[发明专利]一种制备内源性逆转录病毒多克隆抗体的方法无效
申请号: | 201310522218.9 | 申请日: | 2013-10-30 |
公开(公告)号: | CN103601804A | 公开(公告)日: | 2014-02-26 |
发明(设计)人: | 徐丽 | 申请(专利权)人: | 徐丽 |
主分类号: | C07K16/10 | 分类号: | C07K16/10;C07K16/06 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 116000 *** | 国省代码: | 辽宁;21 |
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摘要: | 本发明公开了一种制备内源性逆转录病毒多克隆抗体的方法。步骤如下:首先将PCR扩增P15E基因与GEX-4T-1载体混合,其后进行T载体连接测序以及构件GST重组载体;所述重组载体后将其转化BL-21DE3宿主菌;其后进行IPTG的诱导表达;对P15E进行蛋白纯化;纯品蛋白与佐剂混合;其后对动物进行免疫注射;获取血清;Western-blot印迹法;最后进行Elisa检测。其中脱色液使用如下比例配制:甲醇:水:冰甲酸为20:15:6;脱色液中可以加入90ml超纯水。本发明的有益效果是,实验简单,费用较低,抗体的制备为将来检测临床器官和人工肝中的PERV的表达及传播具有重要意义。 | ||
搜索关键词: | 一种 制备 内源 逆转录 病毒 克隆 抗体 方法 | ||
【主权项】:
一种制备内源性逆转录病毒多克隆抗体的方法,其特征在于,步骤如下:首先将PCR扩增P15E基因与GEX‑4T‑1载体混合,其后进行T载体连接测序以及构件GST重组载体;所述重组载体后将其转化BL—21DE3宿主菌;其后进行IPTG的诱导表达;对P15E进行蛋白纯化;纯品蛋白与佐剂混合;其后对动物进行免疫注射;获取血清;Western‑blot印迹法;最后进行Elisa检测。
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