[发明专利]一种能够有效筛选shRNA片段的方法无效
申请号: | 201310531291.2 | 申请日: | 2013-11-01 |
公开(公告)号: | CN103614461A | 公开(公告)日: | 2014-03-05 |
发明(设计)人: | 刘军 | 申请(专利权)人: | 刘军 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12Q1/02 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 116000 辽宁*** | 国省代码: | 辽宁;21 |
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摘要: | 本发明公开了一种能够有效筛选shRNA片段的方法,其特征在于,步骤如下:首先选择事情设计好的目标shRNA,将其连接与目标载体中;将需要重组的质粒载体转染至shRNA中;组件中采用多重比较法进行比较,当其转染上细菌后,选择最有效的基因沉默;再与其他实验组进行比对,对于最有效的干扰质粒,即为需要选择的shRNA片段。重组蛋白的时候,滴入含有安卡青霉素的溶液,浓度百分比至少为15%;表达绿色荧光蛋白的重组质粒24小时内可以在荧光显微镜下进行筛选。本发明的有益效果是,可以有效鉴定PVCR,同时效果明显,表达清楚、稳定,为下一步能够成功建立模型奠定坚实基础。 | ||
搜索关键词: | 一种 能够 有效 筛选 shrna 片段 方法 | ||
【主权项】:
一种能够有效筛选shRNA片段的方法,其特征在于,步骤如下:首先选择事情设计好的目标shRNA,将其连接与目标载体中;将需要重组的质粒载体转染至sh RNA中;组件中采用多重比较法进行比较,当其转染上细菌后,选择最有效的基因沉默;再与其他实验组进行比对,对于最有效的干扰质粒,即为需要选择的sh RNA片段。
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