[发明专利]用于混合样品中手性化合物对映体过量值直接测定的方法

摘要

本发明公开了一种用于混合样品中手性化合物对映体过量值直接测定的方法，首先利用第一维色谱单元将待测对映体过量值的手性化合物与其他杂质分离并收集至定量环中，再通过两个十通阀的切换，将收集在定量环中的手性对映体转移至配备有手性色谱柱的第二维色谱单元中，利用第二维色谱单元测定得到定量环中的手性化合物的对映体过量值。本发明能够实现混合样品中手性化合物对映体过量值的直接测定，而不需要经过前期复杂的样品纯化过程，从而大大降低了生产成本，缩短了分析时间，同时提高了色谱系统分离能力，应用范围广，尤其适合于不对称合成粗产物中手性药物对映体过量值的测定。

主权项

一种用于混合样品中手性化合物对映体过量值直接测定的方法，包括第一维色谱单元、第二维色谱单元和两个十通阀，所述的第一维色谱单元包括第一维输液泵(11)、第一维色谱柱(13)、自动进样器(12)及DAD检测器(20)；所述的第二维色谱单元包括第二维输液泵(16)、第二维色谱柱(14)；定量环(18)以及两个十通阀作为第一维液相和第二维液相的转换接口，其中：第一维色谱柱(13)的进口端及出口端分别与自动进样器(12)及第一十通阀(15)的1号接口相连，自动进样器(12)与第一维输液泵(11)连接；第二维色谱柱(14)的进口端及出口端分别与第一十通阀(15)的5号接口及9号接口相连；定量环(18)的两端接口分别与第二十通阀(19)的9号和6号接口相连；DAD检测器(20)与第二十通阀(19)的7号接口相连；第二维输液泵(16)与第一十通阀(15)的4号接口相连；第一十通阀(15)的2号接口与废液缸(17)相连；第一十通阀(15)的10号接口与第二十通阀(19)的8号接口相连；第一十通阀(15)的3号接口与第二十通阀(19)的10号接口相连；第一十通阀(15)的6号接口与第二十通阀(19)的5号接口相连；所述的第一十通阀(15)和第二十通阀(19)的其他接口无连接；其特征在于：在线测定步骤如下：（1）将第一维色谱柱(13)及第二维色谱柱(14)安装于高效液相色谱仪上；（2）将需测定对映体过量值的混合溶液加入至色谱进样瓶中；（3）通过自动进样器(12)进样，此时第一十通阀(15)位置为10‑1即10号接口与1号接口连通，第二十通阀(19)位置为1‑2即1号接口与2号接口连通；（4）待极性较小的杂质经过DAD检测器(20)，而待检测的手性对映体即将从第一维色谱柱(13)上洗脱下来时，第一十通阀(15)位置保持为10‑1，第二十通阀(19)位置切换至10‑1，此时待检测的手性对映体被收集至定量环(18)中；（5）当待检测的手性对映体已完全从第一维色谱柱(13)上洗脱下来并进入定量环(18)后，第一十通阀(15)位置保持为10‑1，第二十通阀(19)位置切换至1‑2，继续第一维分离，将极性较大的杂质从第一维色谱柱(13)上洗脱下来；（6）待第一维色谱柱(13)中极性较大的杂质被洗脱完全后，第一十通阀(15)位置切换至1‑2，第二十通阀(19)位置保持为1‑2，以进行第二维色谱的分离；在第二维色谱的分离中，待检测手性化合物 的(R)，(S)构型的在第二维色谱柱(14)上被分离，并依次经过DAD检测器(20)、获得色谱图，通过计算色谱图中(R)，(S)构型的峰面积得到对映体过量值。