[发明专利]以红糖为碳源明串珠菌发酵产甘露醇的方法

摘要

本发明公开了一种以红糖为碳源明串珠菌发酵产甘露醇的方法，涉及微生物发酵工艺，该培养基的配方为红糖19～21克、酵母浸粉1.9～2.1克、乙酸钠5克、磷酸氢二钾2克、柠檬酸铵2克，溶于1000ml水中；250ml三角瓶中分装50ml培养基后灭菌；活化好的明串珠菌菌种以1%接菌量加入到培养基中，于30℃120转/分振荡养16～18小时；培养液经10000转/分离心10分钟，去除沉淀(菌体)，往上清液中加入等量的乙醇，经12000转/分离心15分钟，去除沉淀(葡聚糖)，将上清液在4℃结晶而获得甘露醇；从而有效地降低了培养基的成本。

主权项

以红糖为碳源明串珠菌发酵产甘露醇的方法，其特征在于具体步骤如下：（1）以红糖为碳源制备培养基：（1.1）准备原料准确称取红糖19～21克、酵母浸粉1.9～2.1克、乙酸钠5克、磷酸氢二钾2克、柠檬酸铵2克备用；（1.2）调配与溶化磁力搅拌器上放置装300ml水的烧杯，将步骤（1.1）称取的原料加入到烧杯的水中，充分溶化后补加700ml水，即制成培养基；（1.3）分装与灭菌在250ml三角瓶中加入步骤（1.2）制备的培养基50ml后封口，置于高压灭菌锅中121℃灭菌20分钟；（2）明串珠菌发酵产甘露醇（2.1）活化菌种将明串珠菌以1%接菌量加入到50ml三角瓶内的10ml MRS培养基中，振荡培养12～16小时；（2.2）接菌在超净工作台将步骤（2.1）活化好的菌种以1%接菌量加入到步骤（1.3）灭菌后的250ml三角瓶内的50ml培养基中；（2.3）培养将步骤（2.2）接菌后的三角瓶置于摇床中，在30℃下以120转/分的速度振荡培养16～18小时，得培养液；（2.4）分离纯化将步骤（2.3）制得的培养液经10000转/分离心10分钟，去除菌体沉淀得 上清液A；在上清液A中加入等量的乙醇，经12000转/分离心15分钟，去除葡聚糖沉淀得上清液B，将上清液B在4℃结晶即制得甘露醇。