[发明专利]外周血单核细胞基因中mRNA逆转录成ＤＮＡ的方法在审
| 申请号： | 201310537861.9 | 申请日： | 2013-11-05 |
| 公开（公告）号： | CN103614366A | 公开（公告）日： | 2014-03-05 |
| 发明（设计）人： | 辛竹 | 申请（专利权）人： | 辛竹 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 116000 辽宁省大*** | 国省代码： | 辽宁;21 |
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| 摘要： | 本发明公开了外周血单核细胞基因中mRNA逆转录成ＤＮＡ的方法。步骤如下：首先将目标片段选取模版，然后在ＰＣＲ试管中配置反应体系；混合摇匀，高速离心；烤箱中孵育３分钟，温度为７０－７５摄氏度；冰上冷却１分钟；微量离心机简短离心；放入三倍体积的缓冲液以及核糖核酸酶抑制剂、逆转录酶分别2倍体积；再次孵育，时间1-1.5小时；直接取至冰上，冷却3-5分钟后高速离心，于零下50-80温度下保存即可，再次孵育之前需要加入无水乙醇1-1.5倍体积。本发明的有益效果是：操作简单，成本较低，纯度较高，再现性强，数据精确。 | ||
| 搜索关键词： | 外周血 单核 细胞 基因 mrna 逆转录 dna 方法 | ||
【主权项】：
外周血单核细胞基因中mRNA逆转录成ＤＮＡ的方法，其特征在于，步骤如下：首先将目标片段选取模版，然后在ＰＣＲ试管中配置反应体系；混合摇匀，高速离心；烤箱中孵育３分钟，温度为７０－７５摄氏度；冰上冷却１分钟；微量离心机简短离心；放入三倍体积的缓冲液以及核糖核酸酶抑制剂、逆转录酶分别2倍体积；再次孵育，时间1‑1.5小时；直接取至冰上，冷却3‑5分钟后高速离心，于零下50‑80温度下保存即可。
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