[发明专利]一种获得高纯高效的藻毒素降解酶的生物合成方法有效
申请号: | 201310546005.X | 申请日: | 2013-11-06 |
公开(公告)号: | CN103555696A | 公开(公告)日: | 2014-02-05 |
发明(设计)人: | 冯玲玲;万坚;李俊;吴迪;苏佳丽;任彦亮;肖闪 | 申请(专利权)人: | 华中师范大学 |
主分类号: | C12N9/52 | 分类号: | C12N9/52;C12R1/19 |
代理公司: | 武汉科皓知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 42222 | 代理人: | 张火春 |
地址: | 430079 湖*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | 本发明公开了一种获得高纯高效的藻毒素降解酶(MlrA)的生物合成方法,属于生物技术应用或环境保护领域。本发明方法包括如下步骤:将如SEQIDNO.1所示的序列构建到pMAL-C2X上得到pMAL-MlrA;将pMAL-MlrA转化到大肠杆菌TB1中得到MlrA的表达菌;将MlrA的表达菌用IPTG诱导表达,收集诱导表达后的菌体,破碎后利用麦芽糖结合蛋白(MBP)标签纯化得到高纯高效的藻毒素降解酶。本发明通过优化表达载体和表达条件,获得的MBP-MlrA纯度达到90%以上,切除MBP标签后的MlrA纯度可以达到98%以上;通过本发明得到的藻毒素降解酶降解范围广,降解效率高。 | ||
搜索关键词: | 一种 获得 高纯 高效 毒素 降解 生物 合成 方法 | ||
【主权项】:
一种获得高纯高效的藻毒素降解酶的生物合成方法,其特征在于包括如下步骤:(1)将如SEQ ID NO.1所示的MlrA序列构建到原核表达载体pMAL‑C2X上得到表达MlrA的载体pMAL‑MlrA;(2)将pMAL‑MlrA转化到大肠杆菌TB1中得到MlrA的表达菌;(3)将MlrA的表达菌用IPTG诱导表达,收集诱导表达后的菌体,破碎后利用pMAL‑C2X上的融合蛋白表达标签纯化得到高纯高效的藻毒素降解酶。
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