[发明专利]小RNA的3’-5’-qPCR定量检测技术有效
| 申请号： | 201310553552.0 | 申请日： | 2013-11-08 |
| 公开（公告）号： | CN103555848A | 公开（公告）日： | 2014-02-05 |
| 发明（设计）人： | 于文强;肖敏;赵丽萍 | 申请（专利权）人： | 复旦大学 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 上海专利商标事务所有限公司 31100 | 代理人： | 陈静 |
| 地址： | 200433 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种小RNA的3’-5’-qPCR定量检测技术，揭示了一种基于荧光定量PCR技术进行从内向外即3’→5’PCR，对小RNA进行高特异性、高灵敏度以及低成本检测和定量的方法。 | ||
| 搜索关键词： | rna qpcr 定量 检测 技术 | ||
【主权项】：
一种检测待测样品中的特定小RNA的方法，其特征在于：所述方法包括：(1)从待测样品中提取总RNA；(2)以(1)的总RNA为模板，用小RNA特异逆转录引物进行逆转录反应，获得包含cDNA的逆转录产物；其中，所述的小RNA特异逆转录引物的5’端带有无关序列，3’端与小RNA的3’端互补；所述的无关序列与待测样品基因组中任何核酸序列不发生互补；(3)以(2)的包含cDNA的逆转录产物为模板，以小RNA特异正向引物和特异反向引物进行3’→5’PCR反应，获得PCR产物；所述的小RNA特异正向引物的5’端带有无关序列，3’端与小RNA逆转录获得的cDNA的3’端互补；(4)分析(3)的PCR产物，获得小RNA的存在情况及存在量。
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