[发明专利]一种带型蜈蚣藻无性繁殖育苗的方法

摘要

本发明公开了一种带型蜈蚣藻无性繁殖育苗的方法，以盘状体作为外植体，组织捣碎机捣碎后接种于改良VSE培养液的附着基上，1LVSE培养液中添加0.5～2mg的IAA、0.1～0.5mg的ZT和10～15g的蔗糖，于温度18～20℃、光强1000～1500Lx、光照12h的条件下诱导再生盘状体形成；本方法不但可以成功的诱导新的盘状体，还可以有效的抑制丝状体的形成，盘状体的再生诱导率可以达到180%，大大增加了蜈蚣藻的繁殖系数；而本发明中储存盘状体的培养液以及培养基，可以长时间的保存盘状体，盘状体保存1年不会发生变质、死亡以及生长发育的状况，而保存的盘状体恢复到正常的培养条件中，1周即可恢复正常的生长发育状态。

主权项

一种带型蜈蚣藻无性繁殖育苗的方法，其特征在于，包括如下步骤：（1）种源盘状体诱导：以蜈蚣藻果孢子体或四分孢子体作为种藻，除去藻体表面的淤泥、杂藻、坏死组织及其他附着物；用3%次氯酸钠消毒藻体3～5min，然后用无菌过滤海水清洗干净，无菌条件下将种藻切成1～2m2的藻块，将藻块在黑暗条件下阴干15～30min；阴干的藻块放于装有附着基的培养容器中，加入无菌过滤海水，于18～20℃全黑暗条件静置培养；静置培养24h后，将附着基取出放入装有VSE培养液的培养容器中，于温度18～20℃、光强1000～1500Lx、光照12h的条件下诱导盘状体，每2天换一次培养液至盘状体肉眼可见；（2）种源盘状体培育：将步骤1中附有盘状体的附着基转移至新的培养容器中，向培养容器中倒入VSE培养液至淹没附着基，于温度22～25℃、光强2000～2500Lx、光照12h的条件下培育盘状体至直径为0.2‑0.5mm；每2天换一次培养基；（3）再生盘状体诱导：将步骤2中获得的盘状体从附着基上剥离，无菌过滤海水冲洗干净后，用组织捣碎机切碎，将切碎的盘状体洒在铺有附着基的育苗容器中，添加改良VSE培养液后，于温度18～20℃、光强1000～1500Lx、光照12h的条件下诱导再生盘状体形成，每2天换一次培养液至盘状体肉眼可见；（4）直立枝培育：将步骤3中获得的盘状体一部分留作种质资源保存，一部分转移到过滤灭菌的海水中在温度22～24℃、光强2500～3000Lx、光照12h的条件下诱导直立枝发生，直立枝长度为5～8cm后转移到海上进行人工养殖。