[发明专利]一种用于降解木质素废水的复合菌群及其制备方法

摘要

发明公开了一种用于降解木质素废水的复合菌群及其制备方法。该方法先分别挑取土壤杆菌（Agrobacterium sp.），杆状菌（Bacillus sp.），阴沟肠杆菌（Enterobacter.cloacae.），戈登氏菌（Gordonia sp.），恶臭假单胞菌（Pseudomonas putida.），施氏假单胞菌（Pseudomonas stutzeri.）接种培养；按体积百分比计，分别取3～6%土壤杆菌，3～7%杆状菌，10～26%阴沟肠杆菌，34～45%戈登氏菌，16～38%恶臭假单胞菌和12～23%施氏假单胞菌活化后，混合投入到废水中。本发明通过菌种间的协调作用，能有效提高微生物处理木质素的降解效率。

主权项

一种用于降解木质素废水的复合菌群的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：（1）六种细菌对数生长期细胞的制备：分别挑取土壤杆菌（Agrobacterium sp.），杆状菌（Bacillus sp.），阴沟肠杆菌（Enterobacter.cloacae.），戈登氏菌（Gordonia sp.），恶臭假单胞菌（Pseudomonas putida.），施氏假单胞菌（Pseudomonas stutzeri.）六种菌1～2环，将其分别转移到含20～50mL营养液中，每种细菌在27～35℃的条件下培养1～2天，再将培养后的六种菌按菌体与增殖培养基体积比分别以1:9～1:12的比例接种至含300～500mL增殖培养基的容器中，采用不同的增殖培养基培育，其中，土壤杆菌、杆状菌和阴沟肠杆菌的增殖培养基为牛肉膏3.0～4.0g/L，胰蛋白胨5.0～6.0g/L，其余为水；戈登氏菌营养增殖基为葡萄糖8.0～10.0g/L，酵母粉8.0～10.0g/L，其余为水；恶臭假单胞菌增殖培养基为牛肉膏1.5g～2.0/L，葡萄糖1.0～2.0g/L，胰蛋白胨6.0～7.0g/L，酵母粉3.0～4.0g/L，其余为水；施氏假单胞菌的增殖培养基为酪蛋白17.0～20.0g/L，磷酸氢钾2.5～3.0g/L，葡萄糖2.0～3.0g/L，大豆粉3.0～4.0g/L，氯化钠4.0～5.0g/L，其余为水；然后在27～35℃的条件下培养1～2天，以6000～7000rpm的速度离心10～15min后，分别获得上述六种菌体的对数生长期细胞；所述营养液主要成分为牛肉膏1.5～2.0g/L，葡萄糖1.0～2.0g/L，胰蛋白胨5.5～6.5g/L，酵母粉3.0～4.0g/L，pH6.5～7.5，其余为水；（2）六种菌体的混合菌群的复配：将所述六种菌体的对数生长期细胞取出，用磷酸盐缓冲液洗涤后，分别取3～6%土壤杆菌（Agrobacterium sp.），3～7%杆状菌（Bacillus sp.），10～26%阴沟肠杆菌（Enterobacter cloacae），24～35%戈登氏菌（Gordonia），16～38%恶臭假单胞菌（Pseudomonas putida）和12～23%施氏假单胞菌（Pseudomonas stutzeri.）混合；得用于降解木质素废水的复合菌群。