[发明专利]单增李斯特菌主要血清型快速分型试剂盒及应用

摘要

本发明公开了一种单增李斯特菌主要血清型快速分型试剂盒，所述试剂盒包括冻存管和PCR反应管，所述冻存管包括冻存管A、冻存管B、冻存管C、冻存管D、冻存管E、冻存管F和冻存管G，所述冻存管A装有用于PCR反应的Taq DNA聚合酶、10×buffer、dNTP mixture和引物的混合液制备的冻干粉，冻存管B装有裂解液，冻存管C～冻存管F各自装有一种单增李斯特菌主要血清型的阳性对照缓冲液，冻存管G装有稀释液；本发明试剂盒仅一步PCR反应便可准确、快速地鉴别单增李斯特菌全部4种主要血清型，该方法价格低廉，操作简便，特异性与灵敏性好，灵敏性可达102CFU/mL，无交叉反应，结果准确可靠并简单易读，适用于大通量的分型操作。

主权项

一种单增李斯特菌主要血清型快速分型试剂盒，其特征在于所述试剂盒包括冻存管和PCR反应管，所述冻存管包括冻存管A、冻存管B、冻存管C、冻存管D、冻存管E、冻存管F和冻存管G，所述冻存管A装有用于PCR反应的Taq DNA聚合酶、10×buffer、dNTP mixture和引物的混合液制备的冻干粉，冻存管B装有裂解液，冻存管C、冻存管D、冻存管E、冻存管F分别装有单增李斯特菌1/2a型阳性对照缓冲液、单增李斯特菌1/2b型阳性对照缓冲液、单增李斯特菌1/2c型阳性对照缓冲液、单增李斯特菌4b型阳性对照缓冲液，冻存管G装有稀释液，所述稀释液为双蒸水；所述冻存管A中引物的序列为：L1‑F：AGCAAAATGCCAAAACTCGTL1‑R：CATCACTAAAGCCTCCCATTGL2‑F：AGTGGACAATTGATTGGTGAAL2‑R：CATCCATCCCTTACTTTGGACL3‑F：AGGGCTTCAAGGACTTACCCL3‑R：ACGATTTCTGCTTGCCATTCL4‑F：AGGGGTCTTAAATCCTGGAA和L4‑R：CGGCTTGTTCGGCATACTTA。