[发明专利]一种黄梁木植株高效再生方法

摘要

本发明涉及一种黄梁木植株高效再生方法，在不同激素成份及浓度水平下，以DCR、MS为基本培养基，20d～25d无菌苗的子叶和下胚轴为外植体，经不定芽诱导分化、芽增殖和生根培养，形成完整植株小苗，将小苗移栽到育苗基质和种植到大田中，长大的植株与实生苗植株在形态上无明显差异；本发明应用生物技术方法克服种子幼苗高度参差不齐、个体分化大、育苗周期长等问题，提供一种高效、稳定的黄梁木植株再生方法；该方法可进行规模化、工厂化快速育苗，生产出健壮、整齐一致的黄梁木幼苗，不仅可满足市场对黄梁木种苗的需求，而且可以通过转基因研究对黄梁木种质资源进行改良和创新，为黄梁木种质资源的可持续利用奠定基础。

主权项

本发明所述的一种黄梁木植株高效再生方法，其主要特征在于：A无菌苗的获得：将种子置于40℃恒温摇床上震荡浸泡24h～48h；在无菌超净台上，用10％NaClO溶液灭菌10min～15min，无菌水彻底冲洗5次，将种子播于不含任何激素的MS培养基中培养。B子叶和不胚轴外植体的获得：种子培养20d～25d后，切取无菌苗中带子叶柄的子叶和下胚轴作为外植体。C不定芽诱导分化：将外植体接种于添加TDZl.0～5.0mg/L+NAA0.05mg/L的DCR培养基中；培养20d～30d后，将外植体转移到添加6‑BA3.0～5.0mg/L+NAA0.05mg/L的DCR培养基中培养。D增殖培养：在超净台上，从外植体丛生芽中剪取粗壮的单株芽，接种于添加6‑BA1.0mg/L+IBA0.05mg/L的MS培养基中培养。E生根培养：选取增殖培养得到的健壮幼苗，切掉腋芽和稍大的叶片，置于1/2MS+IBA0.1mg/L和NAA0.05mg/L生根培养基诱导生根。F炼苗与移栽：生根培养10d后，将带瓶的组培苗移到温室中适应外界环境1d，然后将组培瓶盖从半开到全开炼苗，喷雾保持瓶内湿度；3d后将组培苗小心取出，洗净粘于根上的培养基，移栽到黄土和泥炭土混合比例为1：2的基质上，在移栽一周内，控制相对湿度75％～85％，温度20℃～35℃；10d后按生长需求浇水。