[发明专利]利用基因芯片结合Real time PCR筛选的烟草内参基因及其方法有效
| 申请号： | 201310594033.9 | 申请日： | 2013-11-22 |
| 公开（公告）号： | CN103642907A | 公开（公告）日： | 2014-03-19 |
| 发明（设计）人： | 郭玉双;任学良;黎瑞源 | 申请（专利权）人： | 贵州省烟草科学研究院 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 北京科亿知识产权代理事务所(普通合伙) 11350 | 代理人： | 汤东凤 |
| 地址： | 550083 贵州省贵阳*** | 国省代码： | 贵州;52 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种利用基因芯片结合Real time PCR筛选的烟草内参基因及其方法，应用本发明的方法，筛选得到烟草新的内参基因烟草磷酸核酮糖激酶基因和烟草双半乳糖二酰甘油合酶基因，其中磷酸核酮糖激酶基因的稳定性高于目前所有报道的烟草内参基因，而烟草双半乳糖二酰甘油合酶基因的稳定性仅次于目前报道烟草内参基因EF-1-a。 | ||
| 搜索关键词： | 利用 基因芯片 结合 real time pcr 筛选 烟草 内参 基因 及其 方法 | ||
【主权项】：
一种利用基因芯片结合Real time PCR筛选烟草内参基因的方法，其特征在于，包括以下步骤：1）首先利用NimbleGen双通道基因芯片分析栽培品种K326的3个部位根、茎、叶，每个部位6个时期，以及花的3个时期，共21个样本的基因的表达量，利用geNorm（3.5）计算出每个基因在21个样本中的变异系数，表征其稳定性，变异系数小于目前应用的内参的基因作为内参的候选基因；2）利用Real time PCR验证芯片杂交的结果，即用Real time PCR验证烟草3个部位根、茎、叶，每个部位6个时期，以及花的3个时期，共21个样本的基因的表达量，利用geNorm（3.5）计算出每个基因在21个样本中的变异系数，表征其稳定性，变异系数小于目前应用的内参的基因作为新筛选的烟草内参。
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