[发明专利]一种膨润土单层剥离纳米片组装酶及其制备方法

摘要

本发明属于生物工程技术领域，公开了一种膨润土单层剥离纳米片组装酶及其制备方法，利用超声和搅拌将层状膨润土剥离成单片的纳米胶体溶液，通过调节酶和膨润土薄片端面的表面电荷，使酶分子吸附在带负电的膨润土纳米片层表面，同时利用膨润土带负电的片层表面和带正电的端面之间的静电吸引，组装成“卡片屋”型的固定化酶。本发明利用酶分子与膨润土纳米片层表面的阳离子之间的离子交换，使酶分子分散的固定在原有的阳离子点位上，有效避免了酶固定化过程中的聚集问题，大大提高了酶分子的负载量，本方法得到的固定化酶的催化活性得到显著提高，克服了一般固定化酶在水相中的催化活性要低于游离酶的缺点，同时实现了生物酶的多批次稳定化操作。

主权项

一种膨润土单层剥离纳米片组装酶的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤(1)：在pH4‑6的缓冲液中加入电解质，然后加入膨润土制成膨润土悬浮液，室温下，将膨润土悬浮液置于超声仪中超声处理，同时搅拌3‑5h，制得膨润土单层纳米薄片胶体溶液；步骤(2)：取步骤(1)制得的胶体溶液，加入生物酶与胶体溶液进行混合，在25℃下振荡10‑24h，反应结束后进行离心得到沉淀，离心速率为10000‑15000rpm，该沉淀用去离子水润洗至中性，冷冻干燥后得到产物固定化酶。