[发明专利]一种转基因甘蔗目的基因元件多重PCR快速筛查方法有效
申请号: | 201310607161.2 | 申请日: | 2013-11-26 |
公开(公告)号: | CN103614471A | 公开(公告)日: | 2014-03-05 |
发明(设计)人: | 陈平华;张卓;陈忠伟;王恒波;施桂姣;项慰;刘迪;邰连赛;林冰;陈利平;陈容;高三基;许莉萍;陈如凯 | 申请(专利权)人: | 福建农林大学 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68 |
代理公司: | 福州元创专利商标代理有限公司 35100 | 代理人: | 蔡学俊 |
地址: | 350002 福*** | 国省代码: | 福建;35 |
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摘要: | 以甘蔗内源基因ALS和外源基因元件(包括Ubiquitin启动子,NOS启动子、NOS终止子,Bar基因和Bt基因)设计多重PCR引物。通过对多重PCR反应体系进行优化建立了添加60%PremixTaqTM体积、0.3μM引物浓度、150ngDNA模板和设定56℃的退火温度的多重PCR反应体系,一次PCR反应可同时检测一个甘蔗内标准基因(ALS基因)和5个外源转基因元件(Ubi启动子、Bt基因、Bar基因、NOS启动子、NOS终止子),并且检测极限可达模板DNA含量的1%。本实验建立的多重PCR反应体系不仅可以检测转基因甘蔗外源基因成分,而且还能有效的检测其它转基因作物。 | ||
搜索关键词: | 一种 转基因 甘蔗 目的 基因 元件 多重 pcr 快速 方法 | ||
【主权项】:
一种转基因甘蔗目的基因元件多重PCR快速筛查方法,其特征在于:多重PCR反应体系含60% 体积Premix TaqTM、热循环的退火温度56℃、引物浓度为0.3μM,一个反应体系内同时含有6种目的基因元件PCR引物;所述的6种目的基因元件,分别是甘蔗ALS基因、Ubiquitin 启动子、Bt基因、Bar基因、NOS启动子和NOS终止子。
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