[发明专利]一种免疫层析试纸条检测微囊藻毒素-LR的方法

摘要

一种免疫层析试纸条检测微囊藻毒素-LR的方法，免疫分析化学技术领域。通过一步制备法制得具有中空结构的Au NCs，将其标记到Anti MC-LR上制得金纳米笼-微囊藻毒素抗体结合物，将BSA偶联的微囊藻毒素-LR、IgG分别喷涂于硝酸纤维素膜上作检测线以及控制线制得免疫层析片条；利用竞争免疫层析法，通过读取检测线上滞留的金纳米笼-微囊藻毒素抗体结合物的灰度值，对试样中微囊藻毒素-LR进行定量分析。不但克服了试纸条技术中金溶胶不易保存的缺点，而且操作简单，抗体的修饰需要的时间较短。

主权项

一种免疫层析试纸条检测微囊藻毒素‑LR的方法，其特征在于按如下步骤：（1）、通过一步制备法制得具有中空结构的Au NCs，将其标记到Anti MC‑LR上制得金纳米笼‑微囊藻毒素抗体结合物，标记过程为：将总量为8～12 μL的 Anti MC‑LR加入浓缩后pH =9的0.25 mL Au NCs溶液中，于20～26℃反应2 ～2.5 h，将含2.5克BSA（牛血清白蛋白）的水溶液加入上述混合液中反应0.4~0.6h、以封闭Au NCs的多余结合位点，低于10°℃高速离心不少于10 min，弃上清液，用PBS缓冲液分散清洗，最后分散在0.9～1.1mL洗脱液中得到Au NCs – Anti MC‑LR溶液，于4 °C保存备用；（2）、将BSA偶联的微囊藻毒素‑LR、IgG分别喷涂于硝酸纤维素膜上作检测线以及控制线制得免疫层析片条；（3）、利用竞争免疫层析法，通过读取检测线上滞留的金纳米笼‑微囊藻毒素抗体结合物的灰度值，对试样中微囊藻毒素‑LR进行定量分析。