[发明专利]一种细菌胞内谷胱甘肽含量的测定方法有效
| 申请号： | 201310611103.7 | 申请日： | 2013-11-26 |
| 公开（公告）号： | CN103592279A | 公开（公告）日： | 2014-02-19 |
| 发明（设计）人： | 李雨庆;徐欣;刘向红;李明云;郭强;周学东 | 申请（专利权）人： | 四川大学 |
| 主分类号： | G01N21/64 | 分类号： | G01N21/64;G01N1/28 |
| 代理公司： | 成都信博专利代理有限责任公司 51200 | 代理人： | 杨宜付;卓仲阳 |
| 地址： | 610065 四川省成都市武侯*** | 国省代码： | 四川;51 |
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| 摘要： | 本发明公开一种细菌胞内谷胱甘肽含量的测定方法，包括以下步骤：绘制不同浓度谷胱甘肽与荧光强度的标准曲线；采用平板菌落计数法进行菌落计数；设置待测菌液实验组和背景荧光对照组；将实验组和对照组处理后，采用荧光强度检测法进行检测；据标准曲线，计算出样品谷胱甘肽含量，根据平板计数计算出样品细菌数量；谷胱甘肽含量与相应细菌数量的比值即为一定个数细菌胞内谷胱甘肽的量。本发明采用mBBr试剂，其能通过革兰阳性菌细胞壁并进入细胞与谷胱甘肽结合，生成稳定的荧光衍生物，之后通过乙腈裂解细菌，解决了测量方法中革兰阳性菌破壁困难的问题。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 细菌 谷胱甘肽 含量 测定 方法 | ||
【主权项】：
一种细菌胞内谷胱甘肽含量的测定方法，其特征在于，包括以下步骤：1）绘制不同浓度谷胱甘肽与荧光强度的标准曲线；2）采用平板菌落计数法进行菌落计数；3）设置待测菌液实验组和背景荧光对照组；4）实验组加入mBBr试剂；对照组加入NEM试剂，混匀后，立刻加入mBBr试剂；5）待实验组和对照组充分反应，分离；6）将反应后的菌体用裂解液裂解；7）在裂解后的溶液中加入甲磺酸水溶液，分离；8）采用荧光强度检测法对步骤7）中的实验组和对照组进行检测；9）据标准曲线，计算出样品谷胱甘肽含量，根据平板计数计算出样品细菌数量；谷胱甘肽含量与相应细菌数量的比值即为一定个数细菌胞内谷胱甘肽的量。
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