[发明专利]一种枸杞无菌苗及其诱导愈伤的获得方法

摘要

本发明公开了一种枸杞无菌苗及其诱导愈伤的获得方法，属于植物组织培养技术领域，它包括以下步骤：果实干燥，种子消毒：用含有70%乙醇、0.1%TritonX-100(聚乙二醇辛基苯基醚)的无菌蒸馏水进行种子消毒，种子萌发：先置于4℃的冰箱中，静置2天，然后移至温度为25±2℃，每日光照14小时的培养室培养20±2天，愈伤继代培养：将种子放置于继代培养基上，25±2℃条件下，每日光照16小时的培养室中培养，每两周更换培养基。该方法在获得枸杞无菌苗的同时获得了枸杞的诱导愈伤组织，简化了枸杞愈伤组织诱导过程中对其进行物理创伤的这一步骤，缩短了获得枸杞愈伤组织的周期。

主权项

一种枸杞无菌苗及其诱导愈伤的获得方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）果实干燥：将收集到的枸杞果实放于尼龙网袋中，吊置于干燥通风的房间中，20‑25℃条件下，放置14天左右，每隔一天翻动一次，直至果实完全干燥；（2）种子消毒：当种子和果皮容易分开时，取出种子，无菌条件下放置于无菌的蓝盖拧口试剂瓶中，加入处理液，将蓝盖拧口试剂瓶置于震荡摇床上，20‑25℃条件下，快速震荡2分钟，然后将种子和处理液一并倒在干燥的无菌滤纸上，无菌条件下，干燥处理；所述处理液为含有70%(v/v)乙醇、0.1%(v/v)Triton X‑100(聚乙二醇辛基苯基醚)的无菌蒸馏水，所述无菌蒸馏水的电阻率≥0.1×106Ω·cm(欧·厘米)；（3）种子萌发：将经过步骤（2）处理的种子轻轻的均匀撒在预处理培养基上，将放有种子的预处理培养基放置于4℃的冰箱中，静置2天，然后移至温度为25±2℃，每日光照14小时的培养室，连续培养20±2天，直至带有愈伤组织的枸杞幼苗出现；（4）愈伤继代培养：在无菌条件下将枸杞愈伤与幼苗分离，放置于继代培养基上，置于培养室中，在温度为25±2℃条件下，每日光照16小时，连续培养，期间每两周换至新的继代培养基上。