[发明专利]一种重组hCE1蛋白的可溶性表达和纯化方法在审
| 申请号： | 201310626175.9 | 申请日： | 2013-11-29 |
| 公开（公告）号： | CN103642825A | 公开（公告）日： | 2014-03-19 |
| 发明（设计）人： | 吕媛;易银沙;童金英;王雷;易尚辉;刘彩云 | 申请（专利权）人： | 湖南师范大学;长沙赢润生物技术有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/55 | 分类号： | C12N15/55;C12N15/70;C12N9/18 |
| 代理公司： | 长沙永星专利商标事务所 43001 | 代理人： | 周咏;林毓俊 |
| 地址： | 410006 湖*** | 国省代码： | 湖南;43 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种重组hCE1蛋白的可溶性表达和纯化方法，包括以生物信息学软件预测hCE1蛋白最佳抗原表位区的分布；用PCR技术扩增含hCE1蛋白最佳抗原表位区的基因截短片段；将得到的基因截短片段克隆至原核表达载体，构建hCE1基因原核表达重组质粒；将构建的hCE1基因原核表达重组质粒转化宿主细胞，获得转化的宿主细胞；培养转化的宿主细胞，以表达重组hCE1蛋白；分离、纯化重组hCE1蛋白。采用本发明方法，达到了理想的蛋白纯度和产量，为后期制备优质的抗hCE1多克隆抗体、抗hCE1单克隆抗体及高特异性的hCE1ELISA试剂盒等研究工作提供了物质基础。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 重组 hce1 蛋白 可溶性 表达 纯化 方法 | ||
【主权项】：
一种重组hCE1蛋白的可溶性表达和纯化方法，其特征在于包括以下步骤：（1）以生物信息学软件预测hCE1蛋白优势抗原表位区的分布；（2）用PCR技术扩增含步骤（1）所述的hCE1蛋白优势抗原表位区的基因截短片段；（3）将步骤（2）得到的基因截短片段克隆至原核表达载体，构建hCE1基因原核表达重组质粒；（4）将步骤（3）构建的hCE1基因原核表达重组质粒转化宿主细胞，获得转化的宿主细胞；（5）培养步骤（4）所述转化的宿主细胞，以表达重组hCE1蛋白；（6）分离、纯化步骤（5）所述重组hCE1蛋白。
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