[发明专利]一种垂花蕙兰的组培快繁方法

摘要

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种垂花蕙兰的组培快繁方法。该方法包括如下步骤，（1）垂花蕙兰原球茎的诱导形成：培养基质为40%松树皮+60%培养基，培养基为1/2MS基本培养基；（2）垂花蕙兰原球茎的增殖培养：培养基质为40%松树皮+60%培养基，培养基为1/2MS+6-BA1.0～2.0mg/L+NAA0.3～0.8mg/L+KT0.3～0.8mg/L+50g/L CW；（3）垂花蕙兰原球茎分化和壮苗生根：培养基质为40%松树皮+60%培养基，培养基为1/2MS+6-BA0.5～1.2mg/L+NAA0.1～0.3mg/L+100g/L PJ；（4）垂花蕙兰试管苗的驯化和移栽。本发明建立了一个低廉高效的垂花蕙兰组培快繁体系。

主权项

一种垂花蕙兰的组培快繁方法，其特征在于：包括如下步骤，（1）垂花蕙兰原球茎的诱导形成：培养基质为40%松树皮+60%培养基；其中培养基为1/2MS基本培养基，白糖30g/L，琼脂5～8g/L，pH5.6；培养基质在121℃、1.1kg/cm2下灭菌18min；剖开消毒好的蒴果，把种子撒到无菌水中，摇匀，然后接种至培养基质上；培养温度为25±2℃，光照强度为1500～2000Lx，光暗周期比为12h:12h；（2）垂花蕙兰原球茎的增殖培养：培养基质为40%松树皮+60%培养基；培养基为1/2MS+6‑BA1.0～2.0mg/L+NAA0.3～0.8mg/L+KT0.3～0.8mg/L+50g/L CW(椰乳)；1/2MS为基本培养基，白糖20g/L，琼脂5～8g/L，pH5.6；培养基质在121℃、1.1kg/cm2下灭菌18min；取已诱导出的原球茎，接种于增殖培养基上；培养温度为25±2℃，光照强度为1500～2000Lx，光暗周期比为12h:12h；（3）垂花蕙兰原球茎分化和壮苗生根：培养基质为40%松树皮+60%培养基；培养基为1/2MS+6‑BA0.5～1.2mg/L+NAA0.1～0.3mg/L+100g/L PJ(马铃薯汁)；1/2MS为基本培养基，白糖20g/L，琼脂5～8g/L，pH5.6；培养基质在121℃、1.1kg/cm2下灭菌18min；将增殖培养的原球茎接种于分化和壮苗生根培养基上；培养温度为25±2℃，光照强度为1500～2000Lx，光暗周期比为12h:12h；（4）垂花蕙兰试管苗的驯化和移栽：将垂花蕙兰生根试管苗从培养室移至塑料大棚放置3～5d后，去瓶盖炼苗3～5d，然后从瓶内取出垂花蕙兰幼苗，用水轻轻洗去培养基，将待栽的垂花蕙兰幼苗根 部用0.1%多菌灵处理10s后，将幼苗移栽入穴盘中的栽培基质内，覆膜保湿5～7d，其间每天通风透气5～15min两次，视光照强度适当加盖遮阳网，一周后完全揭除塑料薄膜小拱棚，喷施1000倍液的甲基托布津，此后进行正常的栽培管理。