[发明专利]利用高含盐氨基酸废水发酵生产饲用汉逊德巴利酵母的方法

摘要

本发明公开了一种利用高含盐氨基酸废水发酵生产饲料用汉逊德巴利酵母的方法，步骤为：1.饲料菌株的驯化培养：通过连续驯化培养的手段，提高菌株对高含盐氨基酸废水的耐受力；2.菌株的发酵，在合适的发酵条件下，于发酵罐中通过一定时间的液体通气培养后得到饲料用酵母菌体。离心收集菌体后于70℃烘箱内干燥至恒重后称重。经计算每升高含盐氨基酸废水最高可获得150g饲料用汉逊德巴利酵母菌体。利用本发明方法，可有效利用废水中含有的氨基酸、微量元素和生长因子，大大降低饲料用汉逊德巴利酵母的生产成本，同时还大为减小了污水处理负荷，达到了综合利用的效果，具有显著的经济与社会效益。

主权项

一种利用高含盐氨基酸废水发酵生产饲料用汉逊德巴利酵母的方法，其步骤是：（1）饲料菌株的连续驯化培养，具体如下：先配制含不同浓度梯度的高含盐氨基酸污水的液体培养基，加1.5%‑2.5%质量体积比琼脂制成固体培养基；将饲料用汉逊德巴利酵母按常规方法活化后，依次接种到上述不同浓度梯度的固体培养基上进行连续传代培养，培养温度为15‑35℃，逐步提高菌种的耐盐能力，最终菌株能在高含盐氨基酸废水占培养基总质量45‑55%的上述培养基中生长；（2）发酵：将步骤（1）驯化的汉逊德巴利酵母菌株按接种量0.5‑5%接种至以高含盐氨基酸废水为氮源的发酵培养基中，在15‑35℃，转速为100‑300 rpm/min的条件下于发酵罐中进行液体发酵，通气系数为0.2‑0.8，发酵2‑7 d后 4000 r/min离心10 min收集菌体后将其置于70℃恒温干燥箱中，干燥至恒重后称重；所述的高含盐氨基酸废水来自毛发酸法水解生产氨基酸的企业工业生产中产生的废水，全氮含量为75‑150 g/L，氨基酸含量为150‑300 g/L，氯离子含量为80‑180 g/L；所述的饲料用汉逊德巴利酵母为来源于中国普通微生物菌种保藏管理中心的汉逊德巴利酵母（Debaryomyces hansenii）CGMCC2.33；所述的含不同浓度梯度的高含盐氨基酸废水的液体培养基，其高含盐氨基酸废水的浓度分别为125 g/L，250 g/L，330 g/L，400 g/L及500 g/L，其他化学基质组分为：碳源：30‑140 g/L、磷酸二氢钾：5‑22.5 g/L，酵母粉：3‑15 g/L，硫酸镁：3‑13.5 g/L，碳酸钙：0.75‑3 g/L，硫酸亚铁：1.5‑6 g/L，培养基pH为3.5‑7.5；其中，碳源为下述的一种或多种糖类的混合物：葡萄糖；蔗糖；糖蜜；玉米淀粉酶解液；红薯淀粉酶解液或木薯淀粉酶解液；所述的高含盐氨基酸废水为氮源的发酵培养基，其配方为：高含盐氨基酸污水：125 g/L‑330 g/L，碳源：30‑100 g/L，磷酸二氢钾：5‑15 g/L，酵母粉：0‑10 g/L，硫酸镁：3‑9 g/L，碳酸钙：0.75‑2 g/L，硫酸亚铁：1.5‑4 g/L，培养基pH为3.5‑7.5；其中，碳源为下述的一种或多种糖类的混合物：葡萄糖；蔗糖；糖蜜；玉米淀粉酶解液、红薯淀粉酶解液或木薯淀粉酶解液。