[发明专利]一种用于检测环境污染物的转基因斑马鱼的制备方法有效
| 申请号： | 201310654584.X | 申请日： | 2013-12-06 |
| 公开（公告）号： | CN103667327A | 公开（公告）日： | 2014-03-26 |
| 发明（设计）人： | 殷建;林颖;胡军 | 申请（专利权）人： | 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所 |
| 主分类号： | C12N15/63 | 分类号： | C12N15/63;A01K67/027 |
| 代理公司： | 北京远大卓悦知识产权代理事务所(普通合伙) 11369 | 代理人： | 史霞 |
| 地址： | 215163 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种用于检测环境污染物的转基因斑马鱼的制备方法，包括：(1)从斑马鱼基因组中克隆Mdr1蛋白的启动子调控序列；(2)将克隆的DNA片段融合于GFP编码序列的上游构建表达载体；(3)将该表达载体进行斑马鱼胚胎显微注射；(4)将注射后的胚胎培养至性成熟，并与野生型斑马鱼交配产卵；(5)荧光显微镜下筛选阳性的F1代，继续自交传至F2代，得到稳定遗传的转基因品系。由于荧光蛋白的表达水平可受到重金属及多环芳烃等多种环境污染物浓度依赖性的诱导，因而本案所制备的转基因斑马鱼可用于探测环境中的上述化学污染物的存在及浓度，且具有经济、快速、方便、准确的优点。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 用于 检测 环境 污染物 转基因 斑马 制备 方法 | ||
【主权项】：
一种用于检测环境污染物的转基因斑马鱼的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤(1)，从斑马鱼基因组中克隆Mdr1蛋白的启动子调控序列；步骤(2)，将步骤(1)中克隆的DNA片段融合于GFP编码序列的上游，构建成表达载体Mdr1promoter‑GFP；步骤(3)，将所述表达载体Mdt1promoter‑GFP进行斑马鱼胚胎显微注射；步骤(4)，将注射后的胚胎培养至性成熟，并与野生型斑马鱼交配产卵；步骤(5)，荧光显微镜下筛选阳性的F1代，继续自交传至F2代，得到稳定遗传的转基因品系。
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