[发明专利]一种硒的检测方法

摘要

本发明涉及一种硒形态及单质硒、总硒的检测方法，选用了不同仪器生产厂家的色谱分离系统和原子荧光分光光度计组合成HPLC-HG-AFS联用系统，可进行形态硒分析、单质硒及样品中无机硒、总硒的测定方法：测定结果准确；通过总硒、无机硒的测定，采用总硒减去无机硒的方法可间接得到有机硒含量，可形成形态分析法测定总硒、无机硒、有机硒的新技术。该方法可移植性强，使用方便灵活，具有推广应用价值。

主权项

一种硒的检测方法，其特征在于包含以下步骤：a.分析仪器系统配置：将色谱分离系统、原子荧光分光光度计及硒形态预处理装置组合成HPLC‑HG‑AFS联用系统；色谱柱要能够对SeO₃⁴⁺、SeO₄⁶⁺、硒代氨基酸及衍生物、二甲基硒、硒脲小分子物质有保留的C₁₈柱或阴离子交换柱；所述的硒形态预处理装置为能够与色谱分离系统连接，将色谱系统分离的待测样品中含硒成分转化为氢化物的硒形态预处理装置；b.仪器分析方法：流动相为不同浓度的（NH₄）₂HPO₄缓冲液或添加有机试剂的溶液；洗脱方式采用30mM‑150mM的pH3‑9磷酸氢二铵缓冲液配制成一种流动相等度洗脱或改变流速进行梯度洗脱，也可配制成2种以上不同浓度的流动相，通过改变流动相的比例进行梯度洗脱；进样可采用手动或自动2种方式，进样体积在0.1μL‑100μL之间；其它参数按照仪器设备使用说明书推荐设定；所述的添加有机试剂的溶液为添加甲醇或其它有机试剂的溶液；c.硒形态的检测方法：提取溶剂为0.1‑1N的HCl、HClO₄、NaOH、胃蛋白酶K水溶液和50%‑100%的CH₃OH溶液，用HCl和HClO₄提取的溶液，用NaOH溶液调节pH值到5‑6；用NaOH提取的溶液用盐酸调节pH值到8‑9；胃蛋白酶K水提取液和50%‑100%的CH₃OH提取液不调节pH值；提取液均经0.45μm滤膜过滤后上机硒的形态，对有标准物质的成分可以定性定量测定，没有标准物质的成分可为进一步研究提供依据；根据色谱图中峰的分离状况和峰高可确定最佳的提取方法；d.单质硒的测定：采用少量HNO₃、王水或HNO₃+HClO₄溶解后，用NaOH溶液调节pH值到5‑6，经0.45μm滤膜过滤后上机测定，用外标法计算SeO₃⁴⁺的含量，计算硒的回收率，以确定方法的可行性；e.无机硒的测定：定性定量测定样品浸提液中的SeO₃⁴⁺和SeO₄⁶⁺的含量，和为无机硒总量，采用总硒减无机硒的方法可得有机硒含量；f.总硒含量的测定：按照GB方法进行样品消化，消化时可不加盐酸还原，再用NaOH溶液调节pH值至5‑6，定容后上机测定，用外标法计算SeO₃⁴⁺和SeO₄⁶⁺的含量，和为总硒含量。