[发明专利]金吉丽海棠组织培养快速繁殖方法

摘要

本发明涉及一种金吉丽海棠组织培养快速繁殖方法，该方法通过外植体选择与清洗、外植体消毒、初代培养、继代培养和生根培养，得到金吉丽海棠。采用本发明的组织培养方法得到的金吉丽海棠组培苗生根率高、成活率高，繁殖速度快，繁殖系数达到5.3以上，生根率达到90%以上，得到的金吉丽海棠生长健壮，具有广阔的市场前景。

主权项

一种金吉丽海棠组织培养快速繁殖方法，其特征在于：包括以下步骤：1）外植体选择与清洗：4‑5月间从金吉丽海棠的母株的健壮枝条上采集含有腋芽的当年生枝条，用肥皂水浸泡5～15min，流水冲洗30～90min后备用；2）外植体消毒：在超净工作台上先用体积分数为65～75%的酒精将清洗干净的外植体消毒30～60s，无菌水冲洗3～5次，每次2～4min；再用0.2～0.3%升汞消毒5～10min，无菌水冲洗3～5次，每次2～4min；3）初代培养：在超净工作台上将消毒处理好的外植体切成含有腋芽且长度为2～4cm的茎段，并将茎段接入芽诱导培养基中，培养温度为25±1，℃光照时间为10～20h，光强1800～2200Lx；其中，所述的芽诱导培养基的配方为：MS培养基中+0.5～1.2mg·L‑16‑BA+0.05～0.3mg·L‑1NAA+1～5%蔗糖+0.2～1.0%琼脂，pH5.2～5.5；4）继代培养：在初代培养基中培养20～25d，腋芽萌发生长出丛生芽，并进一步生长成幼嫩植株的上半部分，将1.0～3.0cm左右的丛芽采取芽间分离的方式分成单独的嫩枝，转接入增殖培养基，其中，所述的增殖培养基的配方为：MS培养基中+1.5～3.0mg·L‑16‑BA+0.0.5～0.2mg·L‑1NAA+2～6%蔗糖+0.2～1.0%琼脂，pH5.2～5.5；5）生根培养：在增殖培养基中培养22～28d，基部再生出丛芽，将长度超过2.5cm的嫩枝从芽丛上分离，接入生根培养基，培养50d后，形成健壮的生根苗；其中，所述的生根培养基的配方为：MS培养基中+0.1～0.3mg·L‑1IBA+2～6%蔗糖+0.2～1.0%琼脂，pH5.2～5.5。