[发明专利]一种海藻酚酸类物质的分离纯化方法与用途

摘要

本发明是一种海藻酚酸类物质的分离纯化方法，取新鲜江蓠烘干后，粉碎，用甲醇/丙酮/蒸馏水混合溶剂浸泡提取，得浓缩浸提液；调pH至2.0，离心，上清液萃取，混合有机溶剂萃取下层溶液，收集上层，蒸干得酚酸粗提物；粗提物溶解于甲醇，点样于硅胶GF254上，展开；合并收集相同Rf处条带，重新溶解于丙酮，经离心和减压浓缩，制备到4种组分，记为组分A1、组分A2、组分A3和组分A4；减压蒸干，制备到4种酚酸类物质。本发明方法工艺设计合理、工艺可操作性强、提取产物纯度高。本发明所述方法制得的酚酸类物质可以用来抑制米氏凯伦藻、中肋骨条藻和塔玛亚历山大藻的生长。

主权项

一种海藻酚酸类物质的分离纯化方法，其特征在于，其步骤如下：（1）取新鲜江蓠50℃下烘干后，粉碎至0.3 mm干粉末；采用体积比为1:1:1的甲醇/丙酮/蒸馏水混合溶剂对江蓠干粉末进行浸泡提取，经离心、过滤和减压蒸馏，获得浓缩浸提液；（2）用2 mol/L HCl调浓缩浸提液pH至2.0，离心后，上清液用正已烷萃取，弃去上层，保留下层溶液；用体积比为0.8:1的乙醚/乙酸乙酯混合有机溶剂萃取下层溶液，收集上层，上层经无水硫酸钠除水后，40℃下减压蒸干，制备到酚酸粗提物；（3）将酚酸粗提物重新溶解于甲醇，获得待分离甲醇溶液；将此溶液点样于硅胶GF254上，以体积比为15:3:2的氯仿/丙酮/甲酸为展开剂展开；在紫外254 nm下，出现4个斑点，Rf分别为 0.22、0.37、0.63和0.77；在此基础上，以划线法多次点样，合并收集相同Rf处条带，重新溶解于丙酮，经离心和减压浓缩，制备到4种组分，记为组分A1、组分A2、组分A3和组分A4；（4）取0.1 mL 4种组分的浓缩液，加入到质量溶度为1‑5%的三氯化铁溶液中，观察颜色反应，发现呈现蓝绿色，为酚酸类物质的阳性反应；将此4种组分溶液点样于硅胶GF254上，分别在氯仿/甲醇，环己烷/乙酸乙酯和正丁醇/醋酸/水3种展开剂下展开，发现此4种组分均呈现单一斑点，其中组分A1、A2展开剂条件为体积比4:1的氯仿/甲醇、体积比1:2的环己烷/乙酸乙酯、体积比4:1:2的正丁醇/醋酸/水；组分A3、A4展开剂条件为体积比8:1的氯仿/甲醇、体积比1:1的环己烷/乙酸乙酯、体积比4:1:1正丁醇/醋酸/水；同时，采用通用型显色剂10%硫酸溶液和碘以及专属显色剂三氯化铁溶液，发现在此3种显色剂下，此4种组分同样呈现单一斑点，表明纯度达到了薄层纯；减压蒸干，制备到4种酚酸类物质。