[发明专利]链球菌性乳房炎致病菌可视化LAMP检测试剂盒

摘要

本发明公开了一种链球菌性乳房炎致病菌可视化LAMP检测试剂盒，发明人采用环介导等温扩增技术，并根据链球菌属乳房炎致病菌共有的基因保守区设计了两个特异性内引物、两个特异性外引物，由此获得了本发明。应用本发明的LAMP检测试剂盒建立的链球菌性乳房炎致病菌检测方法，无需昂贵的PCR仪、只需普通水浴锅，操作方法简单且成本低，却比PCR检测有更高的灵敏度；检测结果可视化，肉眼判定即可，不必通过凝胶电泳紫外线分析显像观察结果。本发明解决了现有检测技术所需时间长、工作量大、易交叉污染、操作复杂等不足，具有比常规检测方法更特异、敏感的特点，适合在基层兽医站和奶牛养殖场中进行快速检测，具有较好的应用前景。

主权项

一种链球菌性乳房炎致病菌可视化LAMP检测试剂盒，其特征在于包括反应液A，所述反应液A含有10×Bst buffer、8U/μl Bst DNA聚合酶、10mM dNTPs、100mM MgSO₄、40μM的内引物1、40μM的内引物2、5μM的外引物1、5μM的外引物2、5M甜菜碱Betaine、625μM钙黄绿素、12.5mM MnCl₂；所述10×Bst buffer含有pH8.8200mM Tris‑HCl、100mM KCl、100mM(NH₄)₂SO₄、20mM MgSO₄、1%Triton X‑100；所述内引物1序列为CCACCTTCTTCTTTAGAAAGGATGTCCAGGTTCAATCAACCCA，所述内引物2序列为CGTCATACTCCATTCTTCAACAACTAGTTCGATTGAACCTGTTACG，所述外引物1序列为CGTGGTCAAGTTCTTGCTAA，所述外引物2序列为ACCATTTCTGTTCCTGCTG。