[发明专利]一种通过荧光靶向细胞检测病毒和细菌的方法

摘要

本发明涉及一种将细胞高效地转化为生物探针并应用于病毒和细菌检测的方法，包括步骤：将实验室提出的“时-空耦合”新策略这种原创性方法成功地应用于金黄色葡萄球菌（金葡菌）中，从而细菌体内能够高效地被发光量子点点亮，巧妙了构建了一种信号报告体，由于细胞表面天然表达蛋白A，无需进行复杂的代谢和基因工程改性细胞，只需将荧光菌与抗体孵育，离心洗涤多余抗体，细胞壁表面就能够与抗体结合，得到具有靶向性的探针。结合免疫磁捕获方法，通过免疫磁球捕获待检测的病毒或细菌，利用这种荧光靶向探针成功的实现对禽流感H9N2病毒和鼠寒沙门氏菌检测。整个构建细胞探针的方法简单且巧妙，检测过程特异性强，灵敏度高。

主权项

一种通过荧光靶向细胞检测病毒和细菌的方法，其特征在于，包括如下步骤：1）向含有金葡菌的培养基中适时适量加入亚硒酸钠和氯化镉，与细胞共孵育一定时间，在细菌体内就合成了量子点，荧光菌即构建完毕，将细胞离心洗涤后，与抗病毒或细菌表面某种抗原的单克隆抗体孵育，通过离心洗涤多余抗体，即获得荧光靶向细胞，并用牛血清白蛋白进行封闭；2）利用EDC/NHS活化法将抗病毒或细菌的单克隆抗体偶联到表面带羧基的磁性纳米球表面，并用牛血清白蛋白对其进行封闭；将免疫磁球加入样品溶液中孵育，用磁力架吸附并洗涤，最后加入溶液重悬，得到磁球‑病毒/细菌的复合物；3）将(1)构建的荧光靶向细胞加入到（2）得到磁球‑病毒/细菌复合物中孵育，用磁力架吸附并洗涤，最后加入溶液重悬，得到磁球‑病毒/细菌‑荧光菌的复合物，利用荧光显微镜对磁球‑病毒/细菌‑荧光菌进行检测。