[发明专利]一种编码巯基-二硫键氧化还原酶基因的应用

摘要

本发明披露了一种编码巯基‑二硫键氧化还原酶基因在黄原胶生产中的应用。该基因用于构建及选育黄原胶高产的基因工程菌。该基因工程菌携带该基因的重组质粒pL0495，通过将pL0495导入野油菜黄单胞菌野油菜变种的野生型菌株8004获得。本发明鉴定了Xcc8004菌株基因组中编码巯基‑二硫键氧化还原酶基因与黄原胶产量有关，该基因可用于构建、选育黄原胶高产的基因工程菌株。

主权项

1.一种编码巯基‑二硫键氧化还原酶的基因在黄原胶生产中的应用，其特征在于，所述编码巯基‑二硫键氧化还原酶的基因的DNA序列如序列表中的序列1所示，所述应用为构建及选育生产黄原胶的基因工程菌，所述基因工程菌通过将携带所述基因的重组质粒pL0495导入野油菜黄单胞菌野油菜变种的野生型菌株Xcc8004获得；所述重组质粒pL0495通过如下方法制备：根据XC_0531基因的DNA序列，设计引物C053lF：AAGCTT GCGGCAGTCAGTACTGAT；C0531R：GGATCCTCCCATGCTGAATCAAGC，引物的5′端分别加上BamHI和HindIII的酶切位点序列，以Xcc8004菌株总DNA为模板，PCR扩增该基因全长序列，将所获得的DNA片段克隆至载体pGEM3Zf(+)中，用Sanger末端中止法对所克隆的DNA核苷酸序列进行测序验证，将测序验证正确的DNA片段克隆到广谱宿主质粒pLAFR3位点上，获得含XC_0531基因的重组质粒pL0495。