[发明专利]一种柱前衍生化法测定苦碟子注射液中6种氨基酸含量的方法

摘要

发明涉及一种柱前衍生化法测定苦碟子注射液中6种氨基酸含量的方法。属于中药成分分析领域。其步骤如下：（1）混合对照品溶液的配制：制成含脯氨酸217.0mg·L-1，丙氨酸37.40mg·L-1，缬氨酸44.40mg·L-1，异亮氨酸39.80mg·L-1，亮氨酸43.20mg·L-1，苯丙氨酸42.20mg·L-1的混合对照品溶液。（2）供试品溶液的配制。（3）色谱条件：DiamonsilC18(2)色谱柱(200×4.6mm,5μm)；柱温：25℃；检测波长：350nm；流速：1.0mL/min；进样量：10μL；流动相A：水；流动相B：30mmol/LNaAc，含1％N,N-二甲基甲酰胺，pH6.40；流动相C：乙腈；进行梯度洗脱。具有操作简便易行、准确度高、重现性好等优点，为苦碟子注射液的质量控制方法研究奠定了基础。

主权项

一种柱前衍生化法测定苦碟子注射液中6种氨基酸含量的方法，其特征在于其步骤如下：（1）混合对照品溶液的配制：精密称取脯氨酸标准品4.34 mg，丙氨酸标准品3.74 mg，缬氨酸标准品4.44 mg，异亮氨酸标准品3.98 mg，亮氨酸标准品4.32 mg，苯丙氨酸标准品4.22 mg，分别置10 mL量瓶中，先加少量80%乙醇溶解再定容至刻度，摇匀，即得对照品储备液；分别精密吸取对照品储备液适量，制成含脯氨酸217.0 mg·L‑1，丙氨酸37.40 mg·L‑1，缬氨酸44.40 mg·L‑1，异亮氨酸39.80 mg·L‑1，亮氨酸43.20 mg·L‑1，苯丙氨酸42.20 mg·L‑1的混合对照品溶液；（2）供试品溶液的配制：精密量取样品1.00 mL置10 mL量瓶中，加5%碳酸氢钠溶液1.00 mL与1% 2,4‑二硝基氟苯乙腈溶液1.00 mL，摇匀，60 ℃水浴中暗处加热30 min后取出；用0.0l mol/L KH2P04 溶液定容至10 mL，经0.45 μm微孔滤膜滤过，即得供试品溶液；（3）色谱条件：Diamonsil C18(2)色谱柱200×4.6 mm, 5 μm；柱温：25 ℃；检测波长：350 nm；流速：1.0 mL/min；进样量：10 μL；流动相A：水； 流动相B：30 mmol/L NaAc，含1％N,N‑二甲基甲酰胺，pH 6.40；流动相C：乙腈；进行梯度洗脱；（4）进样测定。