[发明专利]芦笋与兴安天门冬种间杂交F1代花药培养再生植株的方法

摘要

本发明涉及一种芦笋栽培种与兴安天门冬种间杂交F₁代花药诱导培养再生植株的方法，属于植物生物技术范畴，该方法包括：选取芦笋种间杂交F₁代的花蕾作为花药培养的供体、前处理、消毒花蕾、剥取、接种和培养花药、获得胚状体、接种到再生培养基中培养直接形成再生芽、切取丛生芽接种至生根培养基中进行生根培养、移栽得到再生植株、倍性鉴定等步骤。本方法首次公开了芦笋种间杂交后代花培再生植株的培养方法，首次培育出芦笋种间杂交后代小孢子来源的双单倍体群体，为后代快速稳定、纯化奠定基础。

主权项

一种芦笋与兴安天门冬种间杂交F₁代花药培养再生植株的方法，其特征在于所述方法包括以下步骤：（1）花蕾前处理：取芦笋种间杂交优良后代的花蕾作为花药培养的供体，于黑暗条件下4℃处理1～7d，待用；（2）花药的剥取和培养：将灭菌后的芦笋种间杂交后代花蕾小心剥开，取花药接入装有添加激素和蔗糖的MS液体培养基的培养皿中，将培养皿在黑暗条件下于30℃～32℃恒温热激处理2～3d后，在黑暗条件下于23℃～28℃培养20～30d，至肉眼可见时，在黑暗条件下于23℃～28℃再振荡培养20～25d，获得胚状体；（3）胚状体的再生：将所述胚状体接种到含有细胞分裂素的再生培养基中，在每天10～16 h光照和23℃～28℃下培养，形成再生芽；（4）再生植株的获得：切取丛生芽接种至生根培养基中，将生长健壮的有根苗炼苗后移栽至基质中，得到再生植株；（5）倍性鉴定：  采用去壁低渗火焰干燥法处理再生植株的茎尖或根尖，进行染色体计数，以确定再生植株的倍性。