[发明专利]一种农杆菌介导的甘蔗转基因方法

摘要

本发明公开了一种农杆菌介导的甘蔗转基因方法，其包括农杆菌转化、超净台吹干、浸染、生根诱导、炼苗、移栽等步骤，以消毒处理后的甘蔗叶圆片为受体，通过农杆菌介导，快速获得一种转基因甘蔗。本发明的方法不受材料限制，节约时间，在三个月内就可获得转基因甘蔗植株，适合大规模的转基因甘蔗研制；同时，方法培养时间短，避免了长期组织培养过程中，外源激素导致变异的影响。

主权项

一种农杆菌介导的甘蔗转基因方法，其步骤如下：1）农杆菌转化：将含有外源基因的农杆菌培养至对数生长期，收集菌体，重悬于含乙酰丁香酮的MS液体培养基中，得到转化菌液； 2）干旱胁迫：酒精表面消毒后切成厚度为0.3～0.5cm的甘蔗叶圆片，在超净台上放置15～50分钟； 3）浸染：将步骤2）处理后的甘蔗叶片浸泡在步骤1）制备的转化菌液中，将液体吸干后再将甘蔗叶圆片置于共培养培养基上，于25～30℃暗培养3～4天；4）生根诱导：将上述经过浸染后的甘蔗叶圆片置于选择培养基培养，进行再生；待苗高为2～3cm时，切取植株接到生根培养基进行生根诱导，得到生根的植株；5）炼苗、移栽：将生根的植株炼苗、移栽，得到转基因甘蔗植株。