[发明专利]一种可有效降低山葵多倍体植物回复突变率的培养方法

摘要

本发明公开了一种可有效降低山葵多倍体植物回复突变率的培养方法，该方法采用将山葵种子消毒后，依次用5-氨基尿嘧啶和丙二醇、胺磺灵和戊炔草胺、秋水仙素和富民隆的混合溶液进行培养，可使所得到的多倍体种子培育的多倍体幼苗的回复突变率有效降低，本发明为山葵优良品种的快速培育提供了一条新途径。

主权项

一种可有效降低山葵多倍体植物回复突变率的培养方法，其特征在于包括如下步骤：（1）取山葵种子，先用0.01%～0.07%的过氧乙酸消毒10～30min，再用无菌水清洗后，置于3～10℃的条件下保存10～15天；（2）将经低温保存的山葵种子，放在浸有5‑氨基尿嘧啶和丙二醇混合溶液的滤纸上培养10～24h，培养温度为5～9℃，所述5‑氨基尿嘧啶和丙二醇混合溶液由浓度为0.5～2.5mmol.L‑1的5‑氨基尿嘧啶溶液和浓度为0.3～0.7mol.L‑1的丙二醇溶液按体积比1:（0.95～1.05）配制；（3）将培养后的山葵种子用无菌水清洗后，置于12～18℃的条件下培养5～9h,再转放在浸有胺磺灵和戊炔草胺混合溶液的滤纸上培养3～10h，培养温度为4～10℃，光照强度为2000～3000lx，所述胺磺灵和戊炔草胺混合溶液由浓度为50～100umol.L‑1的胺磺灵溶液和浓度为20～50umol.L‑1的戊炔草胺溶液按体积比1:（0.95～1.05）配制；（4）将步骤（3）培养的种子用无菌水清洗后，转放在浸有秋水仙素和富民隆混合溶液的滤纸上，在无光照和4～15℃的条件下进行诱导培养，所述秋水仙素和富民隆混合溶液由浓度为0.2～0.8%的秋水仙素溶液和浓度为0.03～0.08%的富民隆溶液按体积比1:（0.95～1.05）配制；（5）将诱导培养2～5天的种子转放在只有无菌水的滤纸上，在温度为8～18℃、光照强度为2500lx～3000lx、光照8～12h的条件下使其萌发生长；（6）选取已萌发出胚根的多倍体种子，将其置于育苗盘中进行25～35天的多倍体幼苗的培育生长，统计山葵多倍体幼苗的回复突变率。