[发明专利]一种嗜盐古生菌假溶源性噬菌体SNJ1的鉴定方法无效
| 申请号： | 201310731028.8 | 申请日： | 2013-12-26 |
| 公开（公告）号： | CN103695564A | 公开（公告）日： | 2014-04-02 |
| 发明（设计）人： | 梅运军;何聪聪;胡纯;张顺喜;黄咏驰 | 申请（专利权）人： | 武汉轻工大学 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70 |
| 代理公司： | 武汉荆楚联合知识产权代理有限公司 42215 | 代理人： | 王健;刘牧 |
| 地址： | 430023 湖北省*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | 一种嗜盐古生菌假溶源性噬菌体SNJ1的鉴定方法，该方法先将待检测嗜盐古生菌涂布在固体培养基上培养5～7d以形成单菌落，再将单菌落接种至上层含有指示菌的双层平板上恒温培养2d，最后观察双层平板上是否形成噬菌斑。本发明无需对单菌落进行增殖培养并使噬菌体与宿主细胞分离即可对噬菌体进行鉴定，不仅缩短了鉴定周期，而且简化了鉴定步骤，降低了成本。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 嗜盐古生菌假溶源性 噬菌体 snj1 鉴定 方法 | ||
【主权项】：
一种嗜盐古生菌假溶源性噬菌体SNJ1的鉴定方法，其特征在于该方法依次包括以下步骤：步骤一：一号培养基、二号培养基的配置：所述一号培养基的配置方法为：先称取NaCl250g、MgCl2·6H2O30g、酵母粉2g、乳清蛋白水解物2.5g、琼脂10～15g并加水混合定容至1000mL以形成固液混合物，再将该固液混合物于0.69×105Pa、100～125℃下灭菌10～60min以得到一号培养基；所述二号培养基的配置方法为：先称取NaCl250g、MgCl2·6H2O30g、酵母粉2g、乳清蛋白水解物2.5g、琼脂4～15g并加水混合定容至1000mL以形成固液混合物，再将该固液混合物于0.69×105Pa、100～125℃下灭菌10～60min以得到二号培养基；步骤二：待测嗜盐古生菌的培养：先向平皿中倒入一号培养基，待一号培养基凝固后在其上均匀涂布待测嗜盐古生菌，再将涂布有待测嗜盐古生菌的一号培养基于42～45℃培养至形成单菌落；步骤三：双层平板的制备：先向平皿中倒入一号培养基，待一号培养基凝固干燥后，将培养到对数期的指示菌液与42～45℃下的二号培养基混合均匀以形成混合培养液，然后将该混合培养液倒入一号培养基上，并使混合培养液凝固以形成双层平板，其中，所述指示菌为Natrinema sp.J7‑2嗜盐古生菌，所述指示菌液的体积为300μL，二号培养基的体积为4.7～5mL；步骤四：噬菌体的鉴定：将步骤二中形成的单菌落接种到双层平板上，并于42～45℃下恒温培养2d后观察双层平板上是否形成噬菌斑，若形成噬菌斑则表明待测嗜盐古生菌内寄宿有假溶源性噬菌体SNJ1，若未形成噬菌斑则表明待测嗜盐古生菌内未寄宿假溶源性噬菌体SNJ1，此时，嗜盐古生菌假溶源性噬菌体SNJ1的鉴定完成。
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