[发明专利]一种人激肽释放酶及其编码基因和应用制备方法有效
申请号: | 201310737079.1 | 申请日: | 2013-12-27 |
公开(公告)号: | CN104745613B | 公开(公告)日: | 2016-01-20 |
发明(设计)人: | 马永;王安良;范宇;孙芳;马骏;章成昌;徐春林;陈晨;王耀方 | 申请(专利权)人: | 江苏众红生物工程创药研究院有限公司;常州京森生物医药研究所有限公司 |
主分类号: | C12N15/57 | 分类号: | C12N15/57;C12N15/81;C12N9/64;C12Q1/37;C12R1/84 |
代理公司: | 北京易正达专利代理有限责任公司11518 | 代理人: | 路远 |
地址: | 213022 江苏*** | 国省代码: | 江苏;32 |
权利要求书: | 暂无信息 | 说明书: | 暂无信息 |
摘要: | 本发明提供了一种人组织激肽释放酶-1(hK1)编码基因、表达纯化方式和活性检测方法,以及一种改良的毕赤酵母发酵BSM培养基。本发明优化后的人激肽释放酶-1编码基因如SEQ?ID?NO1所示。该序列是针对毕赤酵母表达系统进行密码子优化得到的序列,与天然序列相比,其更利于hK1在毕赤酵母中表达;建立的荧光酶活测定方法操作简单,并可应用于高表达单克隆重组工程菌的筛选。此外,改良发酵BSM培养基可在不影响毕赤酵母生产的前提下,促进hK1蛋白的高效表达,且抑制宿主内源蛋白的表达,便于下游分离纯化。由此可见,本发明为hK1蛋白在毕赤酵母中的表达应用奠定了基础。 | ||
搜索关键词: | 一种 激肽释放酶 及其 编码 基因 应用 制备 方法 | ||
【主权项】:
一种重组人激肽释放酶1的编码基因,其特征在于,其碱基序列如SEQ?ID?NO:1所示,在其碱基序列之前还加有如SEQ?ID?NO:3?所示分泌信号肽。
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