[发明专利]一种稳定分泌表达IL-24重组蛋白的细胞株及其构建和应用

摘要

本发明公开了属于基因工程技术领域的一种稳定分泌表达IL-24重组蛋白的细胞株及其构建和应用。本发明的细胞株构建方法为：首先将IL-24基因的CDS区序列亚克隆至Flp-In定点整合系统的pcDNA5/FRT质粒中，然后和质粒pOG44共转染至Flp-In-CHO细胞中，通过抗生素Hygromycin B筛选稳定表达的细胞株。然后，利用亲和层析对细胞株培养上清中的重组蛋白进行纯化；最后，通过体内外活性实验证明此重组蛋白具有抑制食管癌细胞和黑色素瘤细胞增殖的作用，并诱导其凋亡，可以开发出有效的治疗肿瘤的新药。

主权项

一种稳定分泌表达IL‑24重组蛋白的细胞株，其中宿主细胞为Flp‑In‑CHO细胞，IL‑24基因被定点整合到Flp‑In‑CHO细胞的基因组中，所述IL‑24重组蛋白带有His6标签；所述细胞株能稳定分泌IL‑24重组蛋白到细胞的培养上清中。