[发明专利]一种用于芽孢杆菌的高密度培养方法及培养基

摘要

本发明公开一种用于芽孢杆菌的高密度培养方法以及培养基，所述用于芽孢杆菌的高密度培养方法包括以下步骤：S1、菌种的驯化；S2、摇瓶种子培养；S3、种子罐种子培养；S3、发酵罐高密度发酵培养。所述发酵培养基础培养基的成分包括蛋白胨，酵母浸粉，葡萄糖，磷酸氢二钠，磷酸二氢钾，硫酸镁，硫酸锰，氯化钙，豆粕。所述发酵培养基补充培养基为葡萄糖溶液；所述葡萄糖溶液中的葡萄糖含量为发酵液总量3-4%所述用于芽孢杆菌的高密度培养方法适用于枯草芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌的高密度培养。采用本发明所提供的用于芽孢杆菌的高密度培养方法，其发酵液中芽孢杆菌的芽孢形成率可在90%以上，芽孢密度最低在120亿/毫升以上。

主权项

一种用于芽孢杆菌的高密度培养方法，其特征在于，包括如下步骤：S1、菌种的驯化：将斜面保存的菌种用生理盐水稀释后经80°C水浴热处理5~20分钟后，涂布在LB平板培养基上，30‑37°C培养24~72小时；挑取单菌落于生理盐水中再经80°C水浴热处理5~20分钟，涂布在LB平板培养基上；重复上述步骤一次；S2、摇瓶种子培养；S3、种子罐种子培养；S3、发酵罐高密度发酵培养：按照5‑10%的接种量将二级种子罐种子液转入发酵罐的发酵培养基础培养基，在温度30‑37°C，搅拌130‑230转/分钟条件下进行发酵；发酵至培发酵培养基础培养基的残糖含量在1%以下，用发酵培养基补充培养基补糖，所述发酵培养基补充培养基补糖在发酵前9小时内补完，补糖后培养液中的残糖控制在2%以下；当发酵液PH值低于6.0时用碱液将PH调节到7.0‑7.5范围内，直到发酵结束；其中，所述发酵培养基础培养基的成分包括：蛋白胨15~25克/升，酵母浸粉5~15克/升，葡萄糖15~25克/升，磷酸氢二钠2~6克/升，磷酸二氢钾2~6克/升，硫酸镁0.6~0.7克/升，硫酸锰0.3‑0.7克/升，氯化钙0.1~0.3克/升，豆粕0‑10克/升； 所述发酵培养基补充培养基为葡萄糖溶液；所述葡萄糖溶液中的葡萄糖含量为发酵液总量3‑4%。