[发明专利]一种葱莲胚性细胞悬浮培养系的建立和植株再生的方法有效
申请号: | 201310747637.2 | 申请日: | 2013-12-31 |
公开(公告)号: | CN103875528A | 公开(公告)日: | 2014-06-25 |
发明(设计)人: | 于波;朱根发;孙映波 | 申请(专利权)人: | 广东省农业科学院环境园艺研究所 |
主分类号: | A01H4/00 | 分类号: | A01H4/00 |
代理公司: | 广州粤高专利商标代理有限公司 44102 | 代理人: | 倪小敏 |
地址: | 510640 广*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | 本发明公开了一种葱莲胚性细胞悬浮培养系的建立和植株再生的方法。本发明首次在葱莲属植物上建立了胚性细胞悬浮培养系的建立方法,本发明的胚性愈伤组织诱导率最高可达45.2%;胚性细胞悬浮培养系增殖迅速,胚性细胞团鲜重每周最高可增殖2.9倍;胚性细胞团的植株再生率最高可达85.3%。 | ||
搜索关键词: | 一种 葱莲胚性 细胞 悬浮 培养 建立 植株 再生 方法 | ||
【主权项】:
一种葱莲胚性细胞悬浮培养系的建立和植株再生的方法,其特征在于,包括如下步骤:(a)诱导形成胚性愈伤组织; (b)建立胚性细胞悬浮培养系,获得直径大于0.7毫米的胚性细胞团;(c)利用步骤(b)获得的胚性细胞团再生植株,其中所述建立胚性细胞悬浮培养系包括如下步骤:(b1)破碎所述胚性愈伤组织获得直径不超过0.7毫米的胚性细胞团;(b2)将0.2~1.0克的胚性细胞团接种于20mL悬浮培养基中,在温度25~27℃,光照800~1000 lux,90~110转/分钟震荡培养,其中所述悬浮培养基以MS培养基为基本培养基,每1升基本培养基中添加0.5~1.0毫克的噻苯隆、1.0~3.0毫克的2,4‑D、20~40克的蔗糖,pH值为5.6~6.0;(b3)6~8天继代一次,继代时将增殖的胚性细胞团破碎,将0.1~0.2克的胚性细胞团转移至新鲜的悬浮培养基的中,按相同条件继续培养,3~4周后,获得大量胚性细胞团。
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