[发明专利]一种葱莲胚性细胞悬浮培养系的建立和植株再生的方法有效

专利信息
申请号: 201310747637.2 申请日: 2013-12-31
公开(公告)号: CN103875528A 公开(公告)日: 2014-06-25
发明(设计)人: 于波;朱根发;孙映波 申请(专利权)人: 广东省农业科学院环境园艺研究所
主分类号: A01H4/00 分类号: A01H4/00
代理公司: 广州粤高专利商标代理有限公司 44102 代理人: 倪小敏
地址: 510640 广*** 国省代码: 广东;44
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摘要: 发明公开了一种葱莲胚性细胞悬浮培养系的建立和植株再生的方法。本发明首次在葱莲属植物上建立了胚性细胞悬浮培养系的建立方法,本发明的胚性愈伤组织诱导率最高可达45.2%;胚性细胞悬浮培养系增殖迅速,胚性细胞团鲜重每周最高可增殖2.9倍;胚性细胞团的植株再生率最高可达85.3%。
搜索关键词: 一种 葱莲胚性 细胞 悬浮 培养 建立 植株 再生 方法
【主权项】:
一种葱莲胚性细胞悬浮培养系的建立和植株再生的方法,其特征在于,包括如下步骤:(a)诱导形成胚性愈伤组织;   (b)建立胚性细胞悬浮培养系,获得直径大于0.7毫米的胚性细胞团;(c)利用步骤(b)获得的胚性细胞团再生植株,其中所述建立胚性细胞悬浮培养系包括如下步骤:(b1)破碎所述胚性愈伤组织获得直径不超过0.7毫米的胚性细胞团;(b2)将0.2~1.0克的胚性细胞团接种于20mL悬浮培养基中,在温度25~27℃,光照800~1000 lux,90~110转/分钟震荡培养,其中所述悬浮培养基以MS培养基为基本培养基,每1升基本培养基中添加0.5~1.0毫克的噻苯隆、1.0~3.0毫克的2,4‑D、20~40克的蔗糖,pH值为5.6~6.0;(b3)6~8天继代一次,继代时将增殖的胚性细胞团破碎,将0.1~0.2克的胚性细胞团转移至新鲜的悬浮培养基的中,按相同条件继续培养,3~4周后,获得大量胚性细胞团。
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