[发明专利]多组分核酸酶及其使用方法

摘要

本发明涉及多组分核酸酶(MNAzyme)及其使用方法。MNAzyme包含两种或更多种寡核苷酸组分，所述组分在一种或多种MNAzyme组装易化子分子的存在下自组装形成催化活性结构。本发明提供制备MNAzyme的组合物以及MNAzyme集。本发明还提供使用MNAzyme检测、鉴定和/或定量一种或多种靶的方法。所述方法能够在以溶液为基础的分析或将一种或多种反应组分附着到载体结构上的分析中实践。该方法允许使MNAzyme检测复合以便在单一反应中检测多种靶。还提供制备所述组合物以及实践在此提供的方法的试剂盒。

主权项

产生多组分核酸酶(MNAzyme)并测定MNAzyme是否具有催化活性的方法，所述方法包括：选择分裂核酸酶催化核核苷酸序列的点，以在该点的相对侧上形成第一和第二部分催化核部分；在允许MNAzyme自组装和MNAzyme潜在催化活性的条件下，接触包括位于底物臂部分和感应臂部分之间的所述第一部分催化核部分的第一组分寡核苷酸，包括位于底物臂部分和感应臂部分之间的所述第二部分催化核部分的第二组分寡核苷酸，MNAzyme组装易化子，以及潜在的能够由MNAzyme催化修饰的第一底物，其中所述组装易化子与所述第一和第二组分寡核苷酸的所述感应臂部分杂交时，所述第一组分寡核苷酸和所述第二组分寡核苷酸自组装形成MNAzyme，由此维持所述第一和第二寡核苷酸组分的邻近使得它们各自的部分催化核部分缔合形成所述MNAzyme的所述催化核，并且允许所述第一和第二组分寡核苷酸的底物臂部分各自与所述底物的通过所述催化核易化潜在修饰的底物杂交；以及测定MNAzyme是否催化修饰底物，其中底物的催化修饰指示MNAzyme是催化活性的，底物缺乏催化修饰指示MNAzyme无催化活性。