[发明专利]一种体外辅助诊断胰腺癌的试剂盒

摘要

本发明属于生物诊断检测领域，涉及一种体外辅助诊断胰腺癌的试剂盒。人血清miR‐25作为检测靶标可在制备胰腺癌诊断试剂中应用。一种用于体外辅助诊断胰腺癌的试剂盒，包含人血清miR‐25的逆转录引物、实时荧光定量PCR检测人血清miR‐25的引物和探针。本发明通过大量实验研究发现人血清中的miR‐25与胰腺癌发生具有相关性，基于此发现提出了血清miR‐25可以作为一个新的胰腺癌检测靶标，在制备胰腺癌诊断试剂中应用。进而通过设计miR‐25的逆转录体系、以及定性/或定量检测体系，制备得到一种用于体外辅助诊断胰腺癌的试剂盒，该试剂盒具有良好的敏感度和特异度。 1

主权项

1.一种用于体外辅助诊断胰腺癌的试剂盒，其特征在于包含人血清miR‑25的逆转录引物，实时荧光定量PCR检测人血清miR‑25的引物和探针，let7d、let7g或let7i作为内对照，针对内对照的逆转录引物，实时荧光定量PCR检测内对照的引物和探针，不同拷贝数的miR‑25及内对照的非人源RNA溶液作为标准品，含有特定拷贝数的miR‑25及内对照的人工合成品混合液作为阳性质控品，含有特定拷贝数的miR‑25及内对照的人工合成品混合液作为阴性质控品，含有不含miR‑25及内对照的RNA溶液作为空白对照；所述的阳性质控品、阴性质控品及空白对照中miR‑25拷贝数范围如下：表1质控品参考范围阳性质控品10⁵拷贝/μl≤miR‑25的相对拷贝数≤10⁶拷贝/μl阴性质控品10³拷贝/μl≤miR‑25的相对拷贝数≤10⁴拷贝/μl空白对照miR‑25的相对拷贝数≤10³拷贝/μl所述的实时荧光定量PCR检测人血清miR‑25的探针选自以下三条探针中的任意一条或多条的组合:CGGTCTGA GTGCTAA；GGTCTGAGTGCTAAC；GTCTGA GTGCTAACC。