[发明专利]一种pH及温度超敏感性树枝状大分子药物载体三代半及其制备方法

摘要

本发明涉及一种pH及温度超敏感性树枝状大分子药物载体三代半及其制备方法。本发明的目的是使树枝状大分子其在低代数下具有pH及温度超敏感的特性。经过修饰后末端三个羟基的3.5代聚酰胺树枝状大分子与末端变成羧基结构的N‑丙基哌嗪进行健合，即获得G3.5PAMAM‑Tris‑NPPOBA。本发明相对于现有技术，具有如下优点所述方法得到的产物具有pH及温度双重敏感性，且对于pH超敏感，LCST值可调节范围十分广泛。同时具有接近人体温度的临界溶解温度。

主权项

一种pH及温度超敏感性树枝状大分子药物载体三代半，其特征在于，载体为G3.5PAMAM‑Tris‑NPPOBA，即经过修饰后末端三个羟基的3.5代聚酰胺树枝状大分子与末端变成羧基结构的N‑丙基哌嗪进行键合的产物；所述末端变成羧基结构的N‑丙基哌嗪结构如下：所述经过修饰后末端三个羟基的3.5代聚酰胺树枝状大分子是通过如下方法制得的物质，其制备过程如下：以乙二胺和丙烯酸甲酯为原料，摩尔比按照1:4‑5，冰浴，温度保持在0℃；缓慢滴加丙烯酸甲酯的甲醇溶液到乙二胺的甲醇溶液中，滴毕，反复抽真空，氮气保护，恢复室温，然后在35℃下反应6h；反应结束后，旋蒸除去溶剂甲醇，得淡黄色的粘稠液体G0.5PAMAM；以G0.5PAMAM:乙二胺＝1:4‑8(摩尔比)；将乙二胺的甲醇溶液加入到带有磁力搅拌、温度计的三口烧瓶中，冰浴，缓慢滴加G0.5PAMAM的甲醇溶液；滴毕，反复抽真空，氮气保护，在35℃下反应24h，得产物G1.0PAMAM；以G1.0PAMAM:丙烯酸甲酯＝1:16(摩尔比)；将丙烯酸甲酯的甲醇溶液加入到带有磁力搅拌、温度计的三口瓶中，冰浴，缓慢滴加G1.0PAMAM的甲醇溶液；滴毕，反复抽真空，氮气保护，在35℃下反应24h；旋蒸除去未反应的丙烯酸甲酯和溶剂甲醇，得到浅黄色的黏稠液体G1.5PAMAM；以G1.5PAMAM:乙二胺＝1:80(摩尔比)；将乙二胺的甲醇溶液加入到带有磁力搅拌、温度计的三口烧瓶中，冰浴，缓慢滴加G1.5PAMAM的甲醇溶液；滴毕，反复抽真空，氮气保护，在35℃下反应72h；反应完毕，采用真空旋转蒸发仪在35℃下蒸除甲醇，得产物G2.0PAMAM；以G2.0PAMAM:丙烯酸甲酯＝1：24(摩尔比)；将丙烯酸甲酯的甲醇溶液加入到带有磁力搅拌、温度计的三口瓶中，冰浴，缓慢滴加G2.0PAMAM的甲醇溶液；滴毕，反复抽真空，氮气保护，在35℃下反应72h；旋蒸除去未反应的丙烯酸甲酯和溶剂甲醇，得到浅黄色的黏稠液体G2.5PAMAM；以G2.5PAMAM：乙二胺＝1：160(摩尔比)；将乙二胺的甲醇溶液加入到带有磁力搅拌、温度计的三口烧瓶中，冰浴，缓慢滴加G2.5PAMAM的甲醇溶液；滴毕，反复抽真空，氮气保护，在35℃下反应6天；反应完毕，采用真空旋转蒸发仪在35℃下蒸除甲醇，得产物G3.0PAMAM；以G3.0PAMAM:丙烯酸甲酯＝1：48(摩尔比)；将丙烯酸甲酯的甲醇溶液加入到带有磁力搅拌、温度计的三口瓶中，冰浴，缓慢滴加G3.0PAMAM的甲醇溶液；滴毕，反复抽真空，氮气保护，在35℃下反应48h；旋蒸除去未反应的丙烯酸甲酯和溶剂甲醇，得到浅黄色的黏稠液体G3.5PAMAM；以三羟甲基氨基甲烷Tris对G3.5PAMAM进行修饰，使其末端有三个羟基；键合过程为：将N‑丙基哌嗪‑4‑氧代丁酸(NPPOBA)的DMSO溶液或DMF溶液与1‑(3‑二甲基氨基丙基)‑3‑乙基碳二亚胺盐酸盐(EDC·HCl)以及4‑二甲氨基吡啶(DMAP)混合室温下搅拌1h，对NPPOBA进行活化,直到溶液从无色变为红棕色为止活化完成；然后取定量G3.5PAMAM‑Tris的DMSO溶液或DMF溶液，以反应摩尔比G3.5PAMAM‑Tris：NPPOBA：EDC·HCl：DMAP＝1:192:192:192进行反应，于恒压滴液漏斗中，反复三次抽真空，氮气保护后，在磁力搅拌器的匀速搅拌下，G3.5PAMAM‑Tris的DMSO溶液或DMF溶液缓慢滴入圆底烧瓶中，滴加完毕后取下恒压滴液漏斗，在室温下连续反应72h以上；用旋转蒸发仪除去大部分溶剂DMSO或DMF，得到的产物用少量蒸馏水溶解，低于一定温度为澄清的棕红色溶液，高于此温度时溶液变浑浊，将浑浊的液体用超速离心机在温度为40℃，转速5000rpm条件下离心，所得沉淀物用截留分子量为3500的透析袋及大量蒸馏水透析24h得到目标产物。