[发明专利]用于筛选或选择的细胞高通量包封有效
申请号: | 201380005074.8 | 申请日: | 2013-01-09 |
公开(公告)号: | CN104093838A | 公开(公告)日: | 2014-10-08 |
发明(设计)人: | D·斯科特;A·普鲁克图恩 | 申请(专利权)人: | 苏黎士大学 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10;C40B30/06;C40B50/06;C07K14/47 |
代理公司: | 北京泛华伟业知识产权代理有限公司 11280 | 代理人: | 郭广迅 |
地址: | 瑞士*** | 国省代码: | 瑞士;CH |
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摘要: | 本发明涉及用于从表达的核酸序列的文库中选择序列集的方法,其中提供了细胞,每个细胞包含表达为靶蛋白的表达的核酸序列。通过使用阳离子多糖处理细胞,并且随后使用阴离子多糖处理细胞来包封所述细胞,产生包封的细胞,使包封的细胞的膜穿孔,得到溶解的区室,将所述溶解的区室与所述靶蛋白的配体接触,所述配体承载可检测标记,和选择溶解的区室的子集作为可检测标记的函数,以及从选择物中分离所述表达的核酸序列作为选择的序列集。 | ||
搜索关键词: | 用于 筛选 选择 细胞 通量 | ||
【主权项】:
一种用于从表达的核酸序列的文库中选择序列集的方法,其中‑提供了多个细胞,每个细胞包含在所述细胞中表达为靶蛋白的表达的核酸序列,‑在包封步骤中包封所述多个细胞,其包括:ο在阳离子处理步骤中,使用阳离子多糖处理所述多个细胞,ο在阴离子处理步骤中,使用阴离子多糖处理所述多个细胞,所述包封步骤产生多个包封的细胞,‑在溶解步骤中,溶解所述包封的细胞的膜,产生多个溶解的区室,‑在标记步骤中,使所述多个溶解的区室与ο所述靶蛋白的配体接触,所述配体承载可检测标记,或与ο所述靶蛋白的酶活性的指示剂接触,所述酶活性将所述指示剂转化为可检测标记,‑在选择步骤中,选择所述多个溶解的区室的子集作为在所述溶解的区室中存在的可检测标记的函数,以产生选择物,和‑在分离步骤中,从选择物中分离所述表达的核酸序列作为选择的序列集。
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