[发明专利]Rasamsonia转化体在审
申请号: | 201380013996.3 | 申请日: | 2013-03-12 |
公开(公告)号: | CN104838003A | 公开(公告)日: | 2015-08-12 |
发明(设计)人: | 埃里克·皮特·洛斯;伊万内·约翰内斯·奥迪利亚·亚伦德森;阿德里安努斯·维尔赫穆斯·赫曼努斯·沃勒布里吉特 | 申请(专利权)人: | 帝斯曼知识产权资产管理有限公司 |
主分类号: | C12N15/90 | 分类号: | C12N15/90;C12N5/00;C07K14/00 |
代理公司: | 北京东方亿思知识产权代理有限责任公司 11258 | 代理人: | 肖善强 |
地址: | 荷兰*** | 国省代码: | 荷兰;NL |
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摘要: | 本发明涉及在Rasamsonia细胞的靶位点实施重组的方法,其中所述方法包括:-提供两种或多种核酸,它们总共包含:(a)能够与靶位点的侧翼序列同源重组的序列;(b)两个或多个位点特异性重组位点;(c)编码识别位点特异性重组位点的重组酶的序列;和(d)编码标记的序列,其中所述的两种或多种核酸能够相互同源重组以产生一种核酸,和其中所述的两种或多种核酸中的至少两种各包含编码无功能的部分标记的序列;和-在Rasamsonia细胞中,使所述的两种或多种核酸相互重组并与靶位点的侧翼序列重组,以在靶位点插入编码有功能标记的连续核酸序列和编码重组酶的序列,所述编码标记和/或编码重组酶的序列的侧翼是至少两个位点特异性重组位点且所述位点特异性重组位点的侧翼是能够与靶位点的侧翼序列同源重组的序列,从而在Rasamsonia细胞的靶位点实施重组。所述方法可被用于产生无标记的Rasamsonia细胞。 | ||
搜索关键词: | rasamsonia 转化 | ||
【主权项】:
在Rasamsonia细胞的靶位点实施重组的方法,其中所述方法包括:‑提供两种或更多种核酸,它们总共包含:(a)能够与靶位点的侧翼序列同源重组的序列;(b)两个或更多个位点特异性重组位点;(c)编码识别位点特异性重组位点的重组酶的序列;和(d)编码标记的序列,其中所述两种或更多种核酸能够相互同源重组以产生一种核酸,和其中所述两种或更多种核酸中的至少两种各包含编码无功能的部分标记的序列;和‑在Rasamsonia细胞中使所述两种或更多种核酸相互重组和与靶位点的侧翼序列重组,以在靶位点插入编码有功能标记的连续核酸序列和编码重组酶的序列,所述编码标记和/或编码重组酶的序列的侧翼是至少两个位点特异性重组位点,而且所述位点特异性重组位点的侧翼是能够与靶位点的侧翼序列同源重组的序列,从而在Rasamsonia细胞的靶位点实施重组。
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