[发明专利]以记忆T细胞为主要成分的淋巴细胞群的制造方法有效
申请号: | 201380018924.8 | 申请日: | 2013-04-09 |
公开(公告)号: | CN104204195B | 公开(公告)日: | 2017-07-18 |
发明(设计)人: | 关根晖彬;大隅一兴;小森启一郎;清水则夫 | 申请(专利权)人: | 株式会社淋巴技术 |
主分类号: | C12N5/0783 | 分类号: | C12N5/0783 |
代理公司: | 北京市金杜律师事务所11256 | 代理人: | 杨宏军,牛蔚然 |
地址: | 日本*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | 来自外周血的淋巴细胞中,在施行活化培养前初始T细胞占其中的约50%,但该比率经过活化培养将会降低。另一方面,培养开始前为半数以下的记忆T细胞的占有率通过活化培养而增加、甚至达到95%,但如果进一步继续培养,其将逐渐减少。本发明的课题在于提供以不使用抗体等的方式简便且迅速地大量制备CD45RO阳性的记忆T细胞群的方法、以通过所述方法制作的记忆T细胞群为主要成分的医药用组合物等。本发明的特征在于,通过如下工序制造以记忆T细胞为主要成分的大量的淋巴细胞群,所述工序为对采集的淋巴细胞进行活化培养,以培养中的淋巴细胞群的细胞密度大于一定的阈值为指标、检测到淋巴细胞群中的记忆T细胞的占有率达到了期望的值,收获所述细胞群,进行冷冻保存;对所述冷冻保存细胞进行解冻、培养以使其增殖。 | ||
搜索关键词: | 记忆 细胞 主要成分 淋巴细胞 制造 方法 | ||
【主权项】:
以记忆T细胞为主要成分的淋巴细胞群的制造方法,所述制造方法利用依次包括以下工序(a)~(c)的高增殖培养法来进行,工序(a),将采集的淋巴细胞调整为4.0×105个/mL以上、8.0×105个/mL以下的接种细胞密度,在IL‑2及固相化抗CD3抗体、以及适于培养淋巴细胞的培养液的存在下进行活化培养;工序(b),基于悬浮于培养液中的淋巴细胞数为4×105个细胞/mL以上,检测到记忆T细胞群的占有率上升,将工序(a)的淋巴细胞进行冷冻保存;工序(c),对被冷冻的淋巴细胞进行解冻、活化培养。
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