[发明专利]用于使用微流体的多个单细胞捕获和处理的方法、系统和设备

摘要

描述了使用微流体的多个单细胞捕获和处理的方法、系统和设备。提供了用于从较大的细胞群体中捕获、分配和/或操纵单个细胞同时产生基因信息和/或涉及每个单个细胞的反应，工具和技术被提供。不同的捕获配置可被利用以捕获单个细胞，且然后在多室反应配置中处理每个单个细胞。一些实施方案可提供已从细胞的较大群体中分配的多个单个细胞的特异性靶扩增、全基因组扩增、全转录组扩增、实时PCR制备、拷贝数变化、预扩增、mRNA测序和/或单体型分析。一些实施方案可提供其它应用。一些实施方案可被配置用于成像单个细胞或关联的反应产物作为处理的一部分。在一些情况下，反应产物可被收集和/或进一步分析。

主权项

一种用于多个单细胞捕获和处理的微流体设备，所述微流体设备包括：串联耦合的多个捕获配置，和多个多室反应配置；其中每个捕获配置包括：输入通道，输出通道，捕获巢，其被配置以从多个细胞中捕获单细胞，所述捕获巢包括一个或更多个物理障碍物，引流沟，以及一个或更多个旁路通道；其中每个各自捕获配置被配置以从流动通过所述输入通道的多个细胞中捕获单细胞，使得未被捕获的细胞被转移到所述一个或更多个旁路通道中的一个并且流向所述输出通道并且流动至串联的下一个捕获配置；所述捕获巢与所述引流沟耦合，所述捕获巢位于靠近所述输入通道和所述一个或更多个旁路通道的连接点，所述引流沟与所述输出通道耦合，所述旁路通道与所述输入通道和所述输出通道耦合，所述捕获配置被配置以使得：(i)当所述捕获巢未被细胞占用时，流体能够流动通过所述输入通道、通过所述引流沟和所述旁路通道两者，以及从所述引流沟和旁路通道两者流入所述输出通道，并且(ii)当所述捕获巢被细胞占用时，流体流动通过所述旁路通道进入所述输出通道而不流动通过所述引流沟，并且其中溶液仅能够通过所述输入通道和所述输出通道流入或流出所述捕获配置的所述捕获巢、引流沟和旁路通道部分；并且其中所述多个多室反应配置的每个各自多室反应配置与来自所述多个捕获配置的各自捕获配置耦合，且被配置用于单细胞处理；其中每个多室反应配置包括：第一反应室，其被耦合至所述捕获配置，第二反应室，其通过两个不重叠的流体流动路径被耦合至所述第一反应室，被安置以使所述第一和第二反应室彼此流体上分离的阀门，以及被安置以使所述捕获配置与所述多个多室反应配置流体上分离的阀门，其中所述捕获配置和各自多室反应配置被布置使得溶液从所述捕获配置流动到第一反应室，并从所述第一反应室流动到第二反应室。