[发明专利]改善的真菌选择有效
| 申请号： | 201380028411.5 | 申请日： | 2013-05-29 |
| 公开（公告）号： | CN104395454B | 公开（公告）日： | 2021-11-30 |
| 发明（设计）人： | C·L·奥尔森 | 申请（专利权）人： | 诺维信公司 |
| 主分类号： | C12N1/16 | 分类号： | C12N1/16;C12N15/81 |
| 代理公司： | 北京市柳沈律师事务所 11105 | 代理人： | 张文辉 |
| 地址： | 丹麦，*** | 国省代码： | 暂无信息 |
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| 摘要： | 本发明涉及构建重组真菌宿主细胞的方法，该重组真菌宿主细胞包括一个或多个拷贝的整合在其基因组中的多核苷酸构建体，所述方法包括：用包括编码选择性标记物的第一多核苷酸和编码目标多肽的第二多核苷酸的整合型多核苷酸构建体对真菌宿主细胞进行转化，其中第一多核苷酸、其5’非翻译区和/或与其可操作地连接的核糖开关包括在其分支位点和其受体位点之间具有5个核苷酸或更少的剪接体内含子；以及适合的多核苷酸构建体，生成的真菌宿主细胞及制造方法。 | ||
| 搜索关键词： | 改善 真菌 选择 | ||
【主权项】：
一种构建重组真菌宿主细胞的方法，所述重组真菌宿主细胞包括一个或多个拷贝的整合在其基因组中的多核苷酸构建体，所述方法包括：a)提供用整合型多核苷酸构建体转化的真菌宿主细胞，所述构建体包括编码选择性标记物的第一多核苷酸和编码目标多肽的第二多核苷酸，其中所述第一多核苷酸、其5’非翻译区和/或与其可操作地连接的核糖开关包括在其分支位点和其受体位点之间的具有5个核苷酸或更少的剪接体内含子；b)在有益于表达所述选择性标记物的条件下培养转化的真菌宿主细胞；以及c)分离包括一个或多个拷贝的整合在其基因组中的多核苷酸构建体的重组真菌宿主细胞；优选两个或更多个拷贝；甚至更优选三个或更多个拷贝，最优选四个或更多个拷贝。
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