[发明专利]基于免疫测定法的溶液中结合动力学的测定

摘要

本文报道了用于测定结合物与其配体的结合亲和力的方法，所述方法包含如下步骤在样品中包含至少两个不同结合物配体比率的结合物，配体和结合物‑配体‑复合物的样品中，基于免疫测定法结果测定游离结合物分数，并且如果测定的游离结合物分数不是对于所有使用的结合物配体比率是可比的，则降低样品中结合物配体比率，并通过相同的免疫测定法重新分析样品，并根据上述步骤中的游离结合物分数计算结合物与其配体的结合亲和力。

主权项

用于测定药物与其靶标的结合亲和力的方法，所述方法包括以下步骤：‑在游离药物平台，在样品中含有至少两个不同的药物:靶标比率的药物，靶标和药物‑靶标复合物的样品中，基于免疫测定法的结果测定游离药物的分数，并且如果测定的游离药物分数不是对所有使用的药物：靶标比率是可比较的，则降低样品中药物：靶标比率并通过相同的免疫测定法重新分析样品，或在游离药物平台，在样品中含有至少两个不同的药物:靶标比率的药物，靶标和药物‑靶标复合物的样品中，基于免疫测定法的结果测定游离靶标的分数，并且如果测定的游离靶标分数不是对所有使用的药物：靶标比率是可比较的，则增加样品中的药物：靶标比率并通过相同的免疫测定法重新分析样品，和‑基于上述步骤中测定的游离药物分数计算或者基于上述步骤中测定的游离靶标分数计算药物与其靶标的结合亲和力,其中，游离药物平台是指，在得到游离药物分数的恒定值的药物:靶标比率下，其中，“可比较的”表示两个测定值的相对差小于100％，其中所述相对差用以下公式计算：％Diff＝[(最高值)‑(最低值)]/(值的算术平均值)，其中，使用以下公式计算KD值:KD＝(游离药物分数)*(靶标浓度)/(1‑游离药物分数)。