[发明专利]制备患者特异性胶质母细胞瘤动物模型的方法及其用途

摘要

本发明涉及胶质母细胞瘤小鼠模型的生产方法，包括步骤：(a)将分离自患者的胶质母细胞瘤组织分开成4个或更多部分，从每个部分收集1个或更多碎块；(b)将收集的多个碎块的混合物解离为单细胞形式的胶质母细胞瘤细胞；和(c)将包含在步骤(b)中获得的胶质母细胞瘤细胞的移植物样品原位移植到免疫缺陷小鼠的脑中。本发明还涉及通过该方法生产出的小鼠模型，应用该小鼠模型筛选胶质母细胞瘤的治疗剂的方法；和应用该小鼠模型为选择患者特异性胶质母细胞瘤疗法而提供信息的方法。根据本发明的患者特异性胶质母细胞瘤小鼠模型显示出与亲本肿瘤相同的遗传、形态学和病理学性状，从而使得筛选患者特异性胶质母细胞瘤治疗剂或选择更为安全有效的患者特异性胶质母细胞瘤治疗方法成为可能。

主权项

1.一种生产胶质母细胞瘤小鼠模型的方法，包括步骤：(a)将分离自患者的胶质母细胞瘤组织分开成为4个或更多部分，从整个胶质母细胞瘤组织的4个或更多部分的每个部分收集1个或更多碎块；(b)均匀混合所收集的碎块以匀质化来自所述整个胶质母细胞瘤组织的4个或更多部分的每个部分的胶质母细胞瘤组织碎块；(c)通过对混合物顺序地执行机械解离和使用包括蛋白酶和DNase的酶混合物的酶解离从由4个或更多部分收集的碎块解离胶质母细胞瘤单细胞；和(d)通过Percoll梯度离心从移植物样品去除血细胞，所述移植物样品包含在步骤(c)中获得的单细胞形式的胶质母细胞瘤细胞；和(e)通过将所述样品注射到脑位于前囱左侧1.5‑2.5mm和前囱前0.5‑1.5mm和从硬脑膜起深1.8‑2.2mm的位置，将所述移植物样品原位异种移植到免疫缺陷小鼠的脑中，其中在步骤(e)中原位异种移植到免疫缺陷小鼠的脑中的移植物样品含有1x105‑5x105个胶质母细胞瘤细胞且体积为5‑15μl。