[发明专利]高产量地分离包括小RNA的RNA的方法有效
申请号: | 201380045814.0 | 申请日: | 2013-09-03 |
公开(公告)号: | CN104603267B | 公开(公告)日: | 2019-08-27 |
发明(设计)人: | M·希卢姆伯杰;S·希罗伊;V·霍兰德 | 申请(专利权)人: | 凯杰有限公司 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10 |
代理公司: | 上海一平知识产权代理有限公司 31266 | 代理人: | 崔佳佳;马莉华 |
地址: | 德国*** | 国省代码: | 德国;DE |
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摘要: | 本发明提供了从样品分离RNA,包括尺寸为200nt或更少的小RNA的方法,包括以下步骤:a)提供包含RNA和离液剂的组合物;b)加入醇;c)温育该混合物至少2分钟;d)将额外的醇加入该混合物以将混合物中的总醇浓度调节至≥50%;e)将该混合物中所含的RNA结合至核酸结合固相;f)任选地洗涤该结合的RNA;g)任选从地固相洗脱RNA。由于分步加入醇,总RNA产量和小RNA的产量得到提高。 | ||
搜索关键词: | 产量 分离 包括 rna 方法 | ||
【主权项】:
1.一种从样品分离RNA,包括长度为200nt或更少的小RNA的方法,包括以下步骤:a)提供包含RNA和离液剂的组合物;b)加入醇;其中i)步骤b)中醇的加入量相当于为在步骤e)中进行结合而加入的总醇浓度的40%至80%,和/或ii)步骤b)中醇的加入量,使得所得混合物包含的醇浓度范围选自:25%(v/v)至45%(v/v);c)温育步骤b)的混合物至少2分钟;d)将额外的醇加入步骤c)的温育的混合物以将混合物中的总醇浓度调节至≥50%v/v;e)将该混合物中所含的RNA结合至核酸结合固相,其中在步骤e)之后,RNA,包括小RNA结合于该同一核酸结合固相;f)任选地洗涤该结合的RNA;和g)任选地从固相洗脱RNA;其中,所述醇选自:甲醇、乙醇、丙醇和它们的混合物。
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