[发明专利]用于核酸配对末端测序的方法、组合物、系统、仪器和试剂盒有效
| 申请号： | 201380049832.6 | 申请日： | 2013-03-14 |
| 公开（公告）号： | CN104781418B | 公开（公告）日： | 2017-11-07 |
| 发明（设计）人： | B·李;K·Q·劳;J·奥尼尔;J·孔克尔;K·黑利;R·卡辛斯卡斯;Z·马;P·布若斯卡 | 申请（专利权）人： | 生命技术公司 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 中国国际贸易促进委员会专利商标事务所11038 | 代理人： | 刘晓东 |
| 地址： | 美国加*** | 国省代码： | 暂无信息 |
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| 摘要： | 在一些实施方案中，本教导提供用于配对末端测序的方法。在一些实施方案中，待经历配对末端测序的多核苷酸模板包含至少一个交联部分和至少一个易切断部分。在一些实施方案中，配对末端测序反应包括(a)正向测序步骤，(b)切割步骤，和(c)反向测序步骤。在一些实施方案中，配对末端测序反应包括(a)正向测序步骤，(b)交联步骤，(c)切割步骤，和(d)反向测序步骤。 | ||
| 搜索关键词： | 用于 核酸 配对 末端 方法 组合 系统 仪器 试剂盒 | ||
【主权项】：
用于配对末端测序的方法，其包括：(a)在附着至表面并且具有至少一个交联部分和至少一个可切割的易切断部分的单链模板多核苷酸上进行正向测序反应；(b)在所述模板多核苷酸与和模板多核苷酸杂交的第一延伸链之间诱导交联，其中所述第一延伸链是通过第一延伸链产生引物的延伸反应产生的，其中交联是通过用化合物或用辐照处理与第一延伸链杂交的所述模板多核苷酸、以诱导所述模板多核苷酸上的核苷与所述第一延伸链的核苷之间的交联而实现的；(c)通过将所述易切断部分与热、辐照、至少一种化学品或至少一种酶进行反应来切割所述模板多核苷酸，以形成连接到所述表面上、并且与所述第一延伸链交联的截短的模板多核苷酸，任选地形成末端3’磷酸基团，任选地将所述末端3’磷酸基团转化成‑OH基团，和任选地去除被切割的模板多核苷酸的部分；和(d)在所述第一延伸链上进行反向测序反应。
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