[发明专利]选择单克隆细胞集落的方法有效
申请号: | 201380059584.3 | 申请日: | 2013-09-13 |
公开(公告)号: | CN104838012B | 公开(公告)日: | 2017-03-29 |
发明(设计)人: | 胡利安·弗朗西斯·伯克;克里斯托夫·约翰·曼;阿拉斯代尔·麦克米伦·罗伯逊 | 申请(专利权)人: | 分子装置有限公司 |
主分类号: | C12Q1/24 | 分类号: | C12Q1/24;C12Q1/02;C12M1/36 |
代理公司: | 北京天昊联合知识产权代理有限公司11112 | 代理人: | 丁业平,高钊 |
地址: | 美国加利*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | 本发明提供了一种选择出分泌所关注的产物的单克隆细胞集落的方法,该方法包括提供多个细胞培养空间;每个细胞培养空间都具有各自的评估表面,该评估表面具有固定在该评估表面上的第一结合试剂。在所述细胞培养空间中,在生长培养基中孵育细胞以使细胞复制。至少一些所述细胞分泌所关注的产物。在所述细胞培养空间中提供第二结合试剂。起初,所述第二结合试剂是不固定的。所述第一结合试剂和所述第二结合试剂均与所述所关注的产物结合,使得在任意一个细胞培养空间中,细胞对所关注的产物的分泌导致在该细胞培养空间的相应评估表面上形成具有所述第一结合试剂、所关注的产物和所述第二结合试剂的复合物。 | ||
搜索关键词: | 选择 单克隆 细胞 集落 方法 | ||
【主权项】:
一种选择出分泌所关注的产物的单克隆细胞集落的方法,所述方法包括:提供多个细胞培养空间,每个细胞培养空间都具有各自的评估表面,其中所述细胞培养空间为各个分开的培养容器;向各个所述的评估表面提供第一结合试剂,该第一结合试剂被固定在所述的评估表面上;将细胞悬液接种于所述的多个细胞培养空间中;在所述的细胞培养空间中,在生长培养基中孵育所述的细胞,从而使所述的细胞复制,其中至少一些所述的细胞分泌所关注的产物;在所述的细胞培养空间中提供第二结合试剂,该第二结合试剂是非固定的;其中所述的第一结合试剂和所述的第二结合试剂均与所述的所关注的产物结合,使得在任意一个所述的细胞培养空间中,细胞对所述所关注的产物的分泌导致在该细胞培养空间的相应评估表面上形成包含所述第一结合试剂、所述所关注的产物和所述第二结合试剂的复合物;对至少一些所述细胞培养空间中的每一个进行评估以确定所述细胞培养空间的所述评估表面上的所述第二结合试剂的存在情况;和所述细胞悬液在所述的多个细胞培养空间中的接种使得至少一些所述的细胞培养空间接种有且仅有一个细胞,通过针对至少一些所述细胞培养空间中的每一个,测定该细胞培养空间是否包含衍生自单一细胞的单一细胞集落;其中对于实施所述的测定的所述至少一些细胞培养空间中的每一个而言,所述的测定包括,通过在所述的孵育过程中的多个时间点,对所述细胞培养空间中的细胞进行显微观察,而测定是否细胞培养空间接种有且仅有一个细胞;以及通过使用所述的评估和所述的测定来选择细胞培养空间,所选择的细胞培养空间包含分泌所述所关注的产物的单一的单克隆细胞集落,且其中所选择的细胞培养空间接种有且仅有一个细胞。
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