[发明专利]用于蛋白质化学修饰的PICTET-SPENGLER连接反应

摘要

用醛和酮官能化的蛋白质是用于开发经过化学修饰的生物治疗药物和基于蛋白质的材料的有前途的新底物。通常是将它们的反应性羰基与α-效应亲核试剂如取代的肼和烷氧基胺缀合，分别生成腙和肟。然而，得到的C＝N键在生理学相关条件下容易受到水解的影响，这限制了它们在生物系统中的应用。在这里，我们引入了Pictet-Spengler连接反应，所述的Pictet-Spengler连接反应是基于醛和色胺亲核试剂的经典的Pictet-Spengler反应。所述的连接反应利用醛和烷氧基胺的生物正交反应形成中间体氧基亚铵离子；这个中间体经历与吲哚亲核试剂的分子内C C键形成，得到水解稳定的氧杂咔啉产物。利用所述反应进行乙二醛官能化的和甲酰甘氨酸官能化的蛋白质的位点特异性的化学修饰，所述的蛋白质包括治疗用单克隆抗体赫赛汀的一种加有醛标签的变体。结合用于将醛位点特异性的地引入到蛋白质中的技术，所述的Pictet-Spengler连接反应提供了一种获得用于医学应用和材料应用的稳定的生物缀合物的新方法。

主权项

一种化合物，具有下式的结构：其中A存在或不存在并且，当存在时，是被取代的或未被取代的芳基或杂芳基部分，R¹是选自以下的成员：H、被取代的或未被取代的烷基、被取代的或未被取代的杂烷基、被取代的或未被取代的芳基、被取代的或未被取代的杂芳基、卤素、CN、CF₃、酰基、‑SO₂NR⁵R⁶、‑NR⁵R⁶、‑OR⁵、‑S(O)₂R⁵、‑C(O)R⁵、‑COOR⁵、‑CONR⁵R⁶、‑S(O)₂OR⁵、‑OC(O)R⁵、‑C(O)NR⁵R⁶、‑NR⁵C(O)R⁶、‑NR⁵SO₂R⁶和‑NO₂，其中R¹、R²、R³、和R⁴中的两个或更多个与它们所连接的原子一起任选地结合以形成选自以下的成员的环系统：被取代的或未被取代的环烷基、被取代的或未被取代的杂环烷基、被取代的或未被取代的芳基和被取代的或未被取代的杂芳基；R^x和R^y选自H和被取代的或未被取代的烷基，条件是R^x和R^y中的至少一个具有选自以下的结构：其中R^o选自H、被取代的或未被取代的烷基和被取代的或未被取代的杂烷基；和s选自1和2,其中选自R¹、R^x和R^y的成员具有下式的结构：其中L是选自以下的连接基：被取代的或未被取代的烷基和被取代的或未被取代的杂烷基；和X选自可检测的标记、交联部分、聚乙二醇和亲和标记。